Памятка: « правила забора материала на бактериологические методы исследований

Материал на бактериологическое исследование забирается в стерильную посуду до

начала антибактериальной терапии.

Доставлять с соблюдением сроков в биксе без переохлаждения.

КРОВЬ

На стерильность (микрофлору, гемокультуру) забирать с соблюдением асептики во время подъема температуры в подогретую до 37 С питательную «двойную» среду в количестве 10 мл у взрослых и 0.1-5 мл у детей (в соотношении 1:10). Забор крови осуществляют вдвоем: один обрабатывает кожу, пунктирует вену и берет кровь в шприц, второй над пламенем спиртовки открывает пробки флаконов, подставляет под струю крови из шприца, обжигает горлышко флаконов или пробирки, закрывает их и гомогенизирует, чтобы не было сгустков крови. По показаниям одновременно делается мазок на предметном стекле. Доставлять без переохлаждения. Рекомендуется забирать кровь одновременно в три флакона. В вечерние, ночные часы и в воскресенье флаконы с кровью помещать в термостат на 37 С в клинической лаборатории.

МОЧА

На микрофлору забирается утренняя (накопительная) средняя порция мочи после туалета наружных половых органов в количестве 3-5 мл. Доставлять не позднее 2 часов при условии хранения в холодильнике. При уретрите, цистите - забор первой порции мочи.

МОКРОТА

Перед забором почистить зубы, прополоскать рот свежей кипяченой водой или раствором антисептика, без усилий собрать утреннюю (накопительную) мокроту без слюны в количестве 1-5 мл. Доставлять не позднее 2 часов с момента забора.

1. При заболеваниях - стерильным ватным тампоном раздельно для каждого носового
хода из глубоких отделов, предварительно освободив нос от слизи. При сухой
слизистой - увлажненным 0.9% раствором NaCl ватным тампоном.

2. На носительство золотистого стафилококка - из передних отделов полости носа
одним тампоном из обеих носовых ходов, не касаясь кожи носа. Доставлять в

Натощак или через 2 часа после приема пищи, жидкости.

1. На дифтерию - с помощью шпателя тампоном на границе здоровой и пораженной

ткани. Одновременно мазок тампоном из обеих носовых ходов.

При подозрении на дифтерию - 2 или 3 тампона из зева для прямой бактериоскопии, постановки опыта на токсигенность, посева. По показаниям - мазок из мест редкой локализации, зева, носа. Доставлять в течение 2 часов без переохлаждения. В вечерние, ночные часы, воскресенье материал опускать в теплую среду обогащения и хранить в термостате +37 С.

2. На микрофлору - с помощью шпателя ватным тампоном обтереть правую
миндалину, дужки, язычок, левую миндалину, заднюю стенку глотки. Не касаться
слизистой рта, языка! Доставлять в течение 2 часов без переохлаждения.

3. На менингококк - забор и посев у постели больного или лаборатории производит
лаборант, врач-бактериолог с задней стенки носоглотки с помощью шпателя
тампоном, изогнутым под углом 45 в нижней % его длины о пробирку. Доставка и
посев немедленно!

4. На коклюш - у постели больного или в лаборатории производит лаборант с задней
стенки глотки (тампон вниз) изогнутым ватным тампоном под углом 45 . Доставка
и посев немедленно, без переохлаждения.

5. На микоз - ватным тампоном с пораженных участков слизистой. Доставлять в
течение 2 часов без переохлаждения.

ПРОМЫВНЫЕ ВОДЫ БРОНХОВ

В стерильную пробирку в количестве 5 мл. Доставлять в течение 2 часов без переохлаждения.

ЛИКВОР

Последние порции в количестве 1-3 мл в стерильную пробирку с соблюдением правил асептики над спиртовкой. Доставлять немедленно в теплом пенале или помещать на 37 в термостат.

ОТДЕЛЯЕМОЕ РАН

Кожу вокруг раны предварительно обработать раствором антисептика, некротические массы, детрит, гной удалить стерильной салфеткой. Забор материала производить ватным тампоном круговыми вращательными движениями от центра к периферии. По показаниям - 2 тампона, один для нативной бакткриоскопии.

По Cito! - 3 тампона для бактериоскопии, посева и постановки чувствительности к антибиотикам. При наличии в ране дренажа, катетера - внутренняя часть отрезается стерильными ножницами и помещается в флакон с питательной средой. Доставлять в течение 1-2 часов без переохлаждения. Вне часов работы лаборатории материал берется в среду обогащения и хранится в термостате при 37 С в клинической лаборатории.

ПУНКТАТЫ. МАТЕРИАЛ НА АНАЭРОБЫ. ОТДЕЛЯЕМОЕ ГЛУБОКИХ РАН. КУСОЧКИ ТКАНЕЙ

Нативные материалы в шприце в количестве 0.5-3 мл, на конец иглы -резиновую пробирку, завернув в стерильную салфетку, в течение 0.5-2 ч. Кусочки тканей, нативный материал в количестве 0.5-3 мл поместить в стерильные флаконы, пробирки. Доставка в течение 2 часов или с тиогликолевой средой - доставка в течение 12-24 часов.

ГЛАЗА

За 5-6 часов до забора отменить все процедуры и медикаменты. Конъюктива - ватным тампоном со слизистой от наружного к внутреннему краю, не касаясь кожи, раздельно с каждого глаза.

Секрет слезного мешка - после массажа отделяемое ватным тампоном.

Края век - удалить корочки, взять тампоном из язвочек у основания ресниц или выдернуть несколько ресниц и погрузить в питательную среду. Доставлять в течение 2 часов без переохлаждения.

ПОЛОВЫЕ ОРГАНЫ

«С» канал - ватным тампоном в зеркалах до мануального исследования предварительно обработав влагалищную часть ватным тампоном, смоченным физиологическим раствором, не касаясь стенок влагалища.

Вульва - до мануального исследования, после введения зеркала и подъемника брать ватным тампоном с патологически измененных участков.

Матка, придатки матки - при оперативном вмешательстве брать экссудат, кусочки органов во флакон или пробирку с питательной средой.

Отделяемое уретры - после туалета наружных половых органов брать ватным тампоном, не касаясь кожи. Доставлять в чеченце 1-2 часов без переохлаждения.

По показания параллельно с взятием материала врач-гинеколог (врач-уролог) готовит мазки на предметном стекле, используя отдельные стерильные ватные тампоны или гинекологические инструменты, равномерно распределяя материал без грубого втирания и резких штриховых движений.

НА УРЕАПЛАЗМОЗ

Без антибиотиков в течение 2 недель, до провокации.

У мужчин:

из уретры, не мочиться в течение 4-6 часов, головку полового члена обработать стерильным ватным тампоном, смоченным 0.8% раствором NuCl в области наружного отверстия. Первые капли выделений удалить, а последующие посеять. Если нет выделений, то соскоб ложкой Фолькмана на глубину 2-3 см.; 10 мл первой мочи, сеять осадок.

У женщин:

из уретры после массажа через влагалище ложкой Фолькмана соскоб в питательную среду.

Из «С» канала, заднего свода влагалища после предварительной обработки стерильным ватным тампоном, смоченным стерильным 0.8% раствором NaCl соскоб ложкой Фолькмана.

Питательная среда после посева должна быть доставлена в лабораторию в течение 1 часа или поместить на 37 о С в термостат.

ЖЕЛЧЬ

При зондировании при заборе желчи в клиническую лабораторию отдельно порции А, В, С в три стерильные пробирки в количестве 2-5 мл, либо во время операции с помощью шприца в пробирку, соблюдая правила асептики. Доставлять в течение 2 часов.

ГРУДНОЕ МОЛОКО

С соблюдением правил асептики. После туалета молочных желез, предварительно сцедив первые капли в салфетку. Доставлять в количестве 1-3 мл в стерильных флаконах в течение 0.5-1 часа.

При поражении наружного уха обработать кожу 70 спиртом с последующим промыванием физиологическим раствором. Затем отделяемое из очага собирают ватным тампоном. Доставлять в течение 2 часов без переохлаждения.

При поражении среднего, внутреннего уха исследуют пунктаты и материал, полученный во время оперативных вмешательств, собранный в стерильную посуду или с питательной средой (вне часов работы лаборатории).

1. На дизентерию - первые порции, на сальмонеллы - последние порции, или
из судна без следов дез. растворов в количестве 0.5-1 г в пробирку с
глицериновым консервантом (хранить в холодильнике с момента взятия до 12
часов), или нативный в стерильной посуде. Доставлять в течение 2 часов.

2. На холеру - 0.5-1.5 г нативный или холерный консервант.

3. На дисбактериоз, грибы, патогенный стафилококк. УПМ (условно-патогенную
микрофлору) 1-2 г нативного кала в стерильные флаконы с соблюдением
правил асептики. Доставлять в течение 2 часов без переохлаждения.

Техника посева микроорганизмов Бактериологический метод-выделение чистых культур микробов и их последующая идентификация - имеет боль­шое значение в диагностике инфекционных заболеваний, при изуче­нии санитарно-гигиенического состояния объектов внешней среды (вода, воздух, почва, продукты питания) и исследова­нии их по эпизоотическим и эпидемиологическим показателям на зараженность патогенными видами микробов. Однако первым этапом этой методики является посев или пересев бактериальной культуры на различные типы питательной среды.

Материалом для посева могут быть пересеваемые культу­ры бактерий, различные выделения животных и человека, ткани трупа, вода, почва, продукты питания.

Жидкий материал для посева берут петлей или пипеткой. При взятии петлей жидкость должна образовать в кольце петли тонкую прозрачную пленку - «зеркало». Пипетками пользуются в том случае, когда материал засевают в боль­шом или точно отмеряемом объеме.

Рис. 4. Схема пересева культуры микробов из пробирки в пробирку

Способ взятия плотного материала определяется его кон­систенцией. При посевах чаще всего пользуются бактериаль­ной петлей. Все манипуляции, связанные с посевом и выделением микробных культур, производят над пламенем горелки. Бактериальную петлю прокаливают над пламенем непосредст­венно перед взятием материала, затем петлю остужают. Для этого при пересеве микробной культуры с пробирки горячую петлю погружают в конденсационную жидкость, а при пере­севе с чашек Петри прикасаются к поверхности питательной среды, свободной от микробного роста. Достаточно остужен­ная петля не вызывает шипения конденсационной жидко­сти и не растапливает агар при соприкосновении со средой. После окончания посева петлю прожигают повторно для уничтожения находящейся на ней микроб­ной культуры или инфицированного микроорганизмами ма­териала.

Пипетки и шпатели, используемые для посевов, так же, как и бактериальные петли, перед посевом прожигают, а после посевов опускают в дезинфицирующий раствор.

Перед посевом вся посуда проверяется на целостность, далее, на чашках Петри со стороны дна, на про­бирках в верхней трети, надписывают название засеянного материала или ставят номер анализа и дату посева.

Техника посевов на плотные и жидкие питательные среды

1. При посеве в жидкую питательную среду петлю с находя­щимся на ней материалом погружают в среду. Если матери­ал вязкий и с петли не снимается, его растирают на стенке сосуда, а затем смывают жидкой средой. Жидкий материал, набираемый в пастеровскую или градуированную пипетку, вливают в питательную среду.

2. При посеве на скошенный мясо-пептонный агар про­бирку берут в левую руку между I и II пальцами, чтобы ос­нование пробирки находилось на поверхности кисти руки и посев осуществлялся под контролем глаза. Пробку из про­бирки вынимают правой рукой V и IV пальцами, не прика­саясь к той части пробки, которая входит внутрь пробирки. Остальные 3 пальца правой руки остаются свободными для взятия бактериальной петли, посредством которой произво­дится посев. Петлю держат, как писчее перо. После вынима­ния пробки пробирку с питательной средой держат в наклон­ном положении во избежание попадания в нее посторонних микроорганизмов из воздуха.

Петлю с находящимся на ней пересеваемым материалом вводят в пробирку до дна, опускают плашмя на поверхность питательной среды и скользящими движениями наносят штрих снизу вверх, от одной стенки пробирки к другой (рис. 4).

3. При посеве на поверхность плотной питательной среды в чашки Петри чашку держат в левой руке. Дно ее с одной стороны придерживают I и II пальцами, а с другой - IV и V пальцами. Крышку, приоткрытую настолько, чтобы в об­разовавшуюся щель свободно проходили петля или шпатель, фиксируют I и III или I и II пальцами. Небольшое количество исследуемого материала втирают бактериальной петлей в поверхность питательной среды у края чашки (рис. 5). За­тем петлю прожигают, чтобы уничтожить избыток находяще­гося на ней материала. Линию посева начинают с того ме­ста, в котором находится материал. Бактериальную петлю кладут плашмя на питательную среду, чтобы не поцарапать ее поверхности, и проводят штрихи по всей среде или по сек­торам, разграфив предварительно дно чашки (при условии, что среда прозрачна) на несколько равных частей. Нужно стараться, чтобы штрихи, наносимые петлей, располагались как можно ближе друг к другу, так как это удлиняет общую линию посева и дает возможность получить изолированные колонии микроорганизмов.

Рис. 5. Посев на плотную питательную среду в чашки Петри

Для равномерного распределения засеваемого материала по поверхности плотной питательной среды можно пользо­ваться вместо петли тампоном или шпателем.

При обилии в засеваемом материале микробов они растут в виде пленки, покрывающей всю поверхность питательной среды. Такой характер микробного роста получил название сплошного, или газонного. Посев газоном производят, когда нужно получить большие количества микробной культуры одного вида.

4. Из материала, подлежащего посеву в толщу плотной питательной среды, готовят взвесь в стерильной водопровод­ной воде или в изотоническом растворе. Набирают 0,1-1 мл взвеси в пипетку (в зависимости от степени предполагаемого микробного загрязнения) и выливают в пустую стерильную чашку Петри. Вслед за этим чашку заливают 15-20 мл мясо-пептонного агара, расплавленного и остуженного до тем­пературы 40-45°С (при такой температуре пробирка со сре­дой, приложенная к щеке, не должна вызывать ощущения ожога). Для равномерного распределения исследуемого ма­териала в питательной среде закрытую чашку с содержимым слегка вращают по поверхности стола.

5. Посев уколом в столбик питательной среды производят в пробирку со средой, застывшей в виде столбика. Пробир­ку берут в левую руку, как обычно, и в центре столбика до дна пробирки вкалывают петлю с находящимся на ней мате­риалом.

Получение чистых культур

Чистой культурой микробов называют популяцию микроорганизмов одного вида, полученную из изолированной микробной колонии. Под микробной колонией подразумевает­ся потомство бактерий, возникающее в результате размно­жения одной микробной клетки.

Выделение чистой культуры микробов является обяза­тельным этапом всякого бактериологического исследования. Чистая культура необходима для изучения морфологических, культур культуральных, биохимических и антигенных свойств, по со­вокупности которых определяется видовая принадлежность исследуемого микроорганизма.

Для выделения чистых культур микробов из материалов, содержащих обильную смешанную микрофлору, предложено много различных методов. Наибольшее распространение по­лучил метод механического разъединения микроорганизмов, находящихся в исследуемом материале, с целью получения изолированных колоний на поверхности или в глубине пита­тельной среды.

Очень широко применяются элективные питательные сре­ды, стимулирующие развитие тех микроорганизмов, чистую культуру которых предполагается выделить.

Некоторые виды микробов обладают высокой чувствитель­ностью к воздействию определенных факторов внешней сре­ды. Индивидуальная устойчивость микробов к тому или ино­му фактору была использована для разработки методов вы­деления чистых культур путем умерщвления сопутствующей микрофлоры. Этим способом производится выделение споpoвых форм микробов, устойчивых к действию высокой температуры, микобактерий туберкулеза, безразличных к действию концентрированных растворов минеральных кислот, в отли­чие от остальных микробов, содержащихся в мокроте.

При выделении чистой культуры патогенных микробов из патологического материала, загрязненного посторонней мик­рофлорой, прибегают иногда к заражению лабораторных жи­вотных, восприимчивых к тому виду микроба, который пред­полагается выделить из исследуемого материала. Биологи­ческий метод выделения чистой культуры применяется при исследовании мокроты на содержание в ней пневмококков, микобактерий туберкулеза.

Для выделения бактерий в виде чистых культур из­вестно сравнительно мало методов. Чаще всего это де­лают путем изолирования отдельных клеток на твердой питательной среде, используя метод посева штрихом или разлива по чашкам небольшого количества жидкой культуры. Однако получение отдельной колонии не всег­да гарантирует чистоту культуры, поскольку колонии могут вырасти не только из отдельных клеток, но из их скоплений. Если микроорганизмы образуют слизь, то к ней часто прикрепляются посторонние формы. В слу­чае выделения штаммов Bacillus или актиномицетов контаминирующие микроорганизмы могут быть опутаны цепочками клеток или, соответственно, гифами этих микробов. Для очистки предпочтительнее использовать не­селективную среду, поскольку на ней лучше растут кон­таминирующие микроорганизмы и их легче обнаружить. Но даже на неселективной среде не следует очень быст­ро отбирать колонии, поскольку за данный отрезок вре­мени могут не вырасти медленно растущие кон­таминирующие бактерии.

Из чистой культуры обычно вырастают одинаковые колонии и при микроскопировании выявляются похожие клетки, в частности, по размеру и окраске по Граму. Однако возможны исключения, например, колонии, вы­растающие из чистой культуры, могут быть гладкие (S) и шероховатые (R). Кроме того, в чистых культурах различных микроорганизмов могут появиться кокковидные клетки, цисты и споры. Наконец, некоторые микро­организмы проявляют грамвариабельность. Тем не ме­нее, указанные критерии широко используются при опре­делении чистоты культур.

Посев штрихом

Существует много методов посева штрихом в чашки с твердыми средами («штрихованные чашки»), но лишь некоторые из них почти всегда дают изоли­рованные колонии даже при отсутствии навыков у экс­периментатора. Кроме того, можно наливать разведен­ные растворы смешанной культуры на поверхность твер­дых сред в чашках. При работе с анаэробами «штрихованные чашки» или чашки с внесенной в них жидкой культурой в атмосфере воздуха инкубируют затем в анаэростате. Для анаэробов необходимы свежеприготовленные среды, и посев штрихом следует проводить в течение первых 4 ч после их автоклавирования, чтобы избежать накоп­ления растворенного кислорода.

В Г Д

Рис. 6. Удобный метод по­сева штрихом в чашки для получения отдельных коло­ний. А. Для маркировки на обратной стороне чашки Петри карандашом наносят букву Т, разделяющую дно на 3 сектора. Б. Петлей с культурой зигзагом наносят штрихи на поверхности ага­ра в секторе 1, как показано на рисунке. Для этого крыш­ку чашки сначала приподни­мают, а после нанесения штриха сразу закрывают. Петлю стерилизуют в пламе­ни и дают ей остыть (15 с). В. Проводят петлей по по­верхности среды в секторе 1, как показано на рисунке, и затем немедленно наносят ею зигзагом штрихи на по­верхности среды в секторе 2. Прогревают петлю в пла­мени и дают ей остыть. Г. Проводят петлей по поверх­ности среды в секторе 2, как показано, и затем наносят ею зигзагом штрихи на по­верхности среды в секторе 3. Д. Инкубируют опрокинутые вверх дном чашки, как по­казано на рисунке, для того, чтобы конденсирующаяся во­да с крышки не попала на поверхность агара. В секто­ре 1 вырастает большое чис­ло колоний, тогда как в сек­торах 2 и 3 появляются от­дельные хорошо изолирован­ные колонии.

Получение чистой культуры методом рассева в глубине среды (по Коху)

Три пробирки, содержащие по 15 мл мясо-пептонного агара, ставят в водяную баню для расплавления агара. Расплавленную среду остужают до температуры 43-45°С. В пробирку вносят одну бактериальную петлю иссле­дуемого материала. Для лучшего перемешивания материала со средой засеянную пробирку вращают несколько раз, зажав между ладонями. После этого прокаленной и остуженной петлей содержимое 1-й пробирки переносят во 2-ю и таким же образом из 2-й в 3-ю. Приготовленные разведения мик­робов выливают из пробирок в стерильные чашки Петри, обозначенные номерами, соответствующими номерам про­бирок.

После застудневания среды с исследуемым материалом чашки помещают в термостат. Количество колоний в чашках с питательной средой уменьшается по мере разведения мате­риала.

Выделение чистой культуры по способу Дригальского

Расплавленную питательную среду разливают в три чашки Петри. Застывшую среду обязательно подсушивают, так как влажная поверхность ее способствует образованию сливаю­щегося роста. В первую чашку вносят одну каплю исследуе­мого материала и стерильным шпателем втирают его в по­верхность питательной среды. Далее, не прожигая шпателя и не набирая нового материала, шпатель переносят во вто­рую и третью чашки, втирая в поверхность питательных сред оставшийся на нем материал.

Метод рассева по поверхности, предложенный Дригальским, является наиболее употребительным для получения чи­стой культуры микробов. Вместо шпателя можно пользовать­ся петлей. Материал на питательной среде распределяют па­раллельными штрихами по всей чашке в одном направлении. Затем, повернув чашку на 180°, проводят штрихи в направле­нии, перпендикулярном первым штрихам. При таком способе посева материал, находящийся на петле, расходуется посте­пенно, и по линиям сетки, нанесенным в конце посева, вы­растают изолированные колонии микробов.

Анаэростат для культивирования анаэробов

Анаэростат - прибор для выращивания микробов в анаэробных услови­ях. Представляет собой толстостенный металлический цилиндр с герметически привинчивающейся крышкой, на ко­торой имеются вакуумметр и два крана для присоединения к вакуум-насосу.

Правильный диагноз невозможно поставить без предварительно сделанных анализов. Полученная информация помогает врачу в диагностике и обеспечивает назначение правильного лечения. Одним особенным анализом считается бактериальный посев. Он берется из разного биологического материала. В статье рассмотрим все стороны и особенности этой процедуры.

Под бактериологическим посевом понимают особенное микробиологическое исследование, которое проводится в условиях лаборатории. В качестве исследуемого образца берется биологический материал, который подвергается просеиванию при определенной температуре. Цель такого исследования: выявить наличие микроорганизмов и установить их количество. В дальнейшем врач назначает по полученным данным лечение.

Бактериологический анализ широко применяется в онкологии, гинекологии, отоларингологии, хирургии, урологии и других областях.

Показанием для проведения бактериологического исследования считается воспалительный процесс в органах, системах человека и подозрение на заболевание сепсис.

Для исследования могут брать следующий бактериологический материал:

• Мокроту.
• Слизь из зева.
• Слизь из уретры.
• Мочу.
• Сперму.
• Грудное молоко.
• Содержимое кисты.
• Спинномозговую жидкость.
• Желчь.
• Кровь.
• Материал, отделяемый от раны.
• Содержимое воспалительных очагов.
• Слизь из носоглотки.

Из каждого перечисленного биологического материала высеивают следующие микроорганизмы:

1. Слизь из урогенитального тракта исследуют на гонококк, трихомонаду, грибы Candida, уреаплазму, грибы Neisseria gonorrhoeae , микоплазму, грибы Trichomonas vaginalis, листерии. Так же здесь проверят состояние бактериальной флоры.
2. Кровь обследуют на стерильность.
3. Слизь зева и носа проверяют на листерии, гемофильную палочку, гемолитические стрептококки, менингококк, коринобактерии дифтерии, пневмококки, золотистый стафилококк.
4. Раневое отделяемое, гнойные отделения, биопунктат исследуют на синегнойную палочку и псевдомонады.
5. Кал проверяют на йерсинии, сальмонеллы, тифопаратифозный бактерии, условно-патогенные кишечные инфекции, пищевые токсикоинфекции. Так же испражнения обследуют на дисбактериоз кишечника.
6. Мазок, грудное молоко, мочу, соскоб, желчь, сперму, суставную жидкость проверяют на бактериальную флору.

Достоинства и недостатки бактериального посева

К положительным моментам бактериального посева относят:

• Метод исключает ложные реакции.
• Позволяет проводить проверку абсолютно любой жидкости.
• Результат исследования позволяет врачу правильно назначить лечение.

К отрицательной стороне относят:

• Достаточно длительный промежуток проведения исследования.
• Очень высокие требования к получению исследуемого материала.
• Жесткие требования к квалификации персонала, которые проводят бактериологическое исследование.

Как собирают биологический материал

Качество исследования сильно зависит от правильности собранного биоматериала. Поэтому существуют строгие правила по забору, без соблюдения которых невозможно получить правильную информацию о состоянии здоровья человека.

1. Собирать материал необходимо стерильными инструментами и помещать собранное только в стерильную посуду. Если это проигнорировать, забор материала и дальнейшие исследования станут бессмысленными.
2. Собирать биоматериал необходимо строго до начала проведения терапии антибиотиками. В противном случае лаборант выявит ложные данные. Если пациент на сегодняшний день уже проводит антибактериальную терапию, то бактериологические исследования нужно проводить только через 10 дней после окончания приема последней таблетки.
3. При сборе мочи нужно брать только среднюю порцию в утреннее время. Моча обязательно помещается в стерильную посуду. Количество собранного материала должно ровняться 10-15 мл. Кроме этого, обязательно нужно постараться доставить мочу в лабораторию менее чем через 2 часа после сбора.
4. Перед сбором слизи из носа или зева нельзя есть, пить, чистить зубы и полоскать ротовую полость дезинфицирующими средствами.
5. Сбор кала должен осуществляться стерильной лопаточкой. Время сбора утреннее. Складывать материал необходимо в стерильную посуду. Количество собранного кала должно равняться 15-30 грамм. Доставить его в больницу нужно менее чем за 5 часов. Нельзя оставлять кал на ночь и проводить замораживать его.
6. Грудное молоко сцеживается только после проведения гигиенической процедуры. Для этого область сосков и груди тщательно промывают водой, затем обрабатывают тампоном этилового спирта крепостью 70%. Далее сцеживают 15 мл молока, которое не идет на исследование. Следующие 5 мл сцеживают в стерильный контейнер, его и направляют в лабораторию. Доставить материал необходимо в течение двух часов.
7. Кровь на бактериологическое исследование забирают на фоне температуры. Для детей ее количество равняется 5 мл, для взрослых — 15 мл. Здесь нельзя забывать, что забор не проводится в период приема антибиотиков.
8. Собирать мокроту необходимо во время начавшегося приступа кашля. В этот момент из горла выделяется слизь. Мокрота доставляется в лабораторию в течение одного часа.
9. У женщин материал собирают спустя 14 дней после менструации, женщинам нельзя мочиться в течение 2 часов, а так же после приема антибиотиков должен пройти минимум один месяц. При сборе спермы у мужчин нельзя мочиться примерно 5-6 часов до взятия анализа.

Особенности проведения бактериологического анализа

Исследованию подвергаются любые материалы. У каждого из них есть свои особенности проведения.

Посев крови

В нормальном состоянии кровь не содержит никаких возбудителей. Определить их наличие под прибором микроскоп просто невозможно. Для выявления микроорганизмов бактерии сначала размножают в жидкой среде, которая является для них питательной. Затем образцы крови находятся в созданных для них условиях (при температуре 37˚С) до начала видимого роста. Длится этот процесс от 6 до 18 часов. Если исследуются бактерии, которые растут очень долго, кровь выдерживается в питательной среде в течение нескольких дней. Когда бактерии достигают определенных размеров их можно увидеть под микроскопом. На следующем этапе с выявленными бактериями проводят химические реакции, для того чтобы точно определить их вид.

Посев мочи

При исследовании лаборант выявляет микроорганизмы и определяет их количество. Диагностическое значение равняется 104-105 КОЕ/мл. Если их концентрация превышает норму, то говорят о положительном результате, то есть бак посев плохой. Лечение в этом случае сводится к приему антибиотиков, которые наиболее чувствительны к высеянным микроорганизмам. При анализе бывают случаи, когда общий анализ хороший, человек не имеет жалоб, а бак посев показывает кишечную палочку. В этом случае, скорее всего, не были соблюдены стерильные условия. Поэтому сбор и проведение повторных исследований придется повторить.

Посев мокроты

Подобный анализ назначается при частых и затяжных бронхитах. Вместе с выявлением патогенных микроорганизмов лаборант определяет чувствительность к антибиотикам. Это позволяет в дальнейшем правильно назначить эффективное лечение, сократить время болезни и добиться необходимого выздоровления.

Посев кала

Кал проверяют при различных кишечных инфекциях. В материале лаборант идентифицирует возбудителя. В здоровом кишечнике имеются некоторые условно-патогенные микроорганизмы в нужном качестве и количестве. Если микрофлора кишечника изменяется, то названные показатели тоже меняются. Больной жалуется на урчание, проблемы со стулом, метеоризм и боли в животе. Если возникает рвота и сильное расстройство стула, то бак посев проводят на дисбактериоз.

Бактериальный посев кала имеет следующую расшифровку:

• Первая степень: имеются небольшие изменения микробиоценоза, чужая микрофлора не наблюдается.
• Вторая степень: изменено количество бифидофлоры и лактофлоры, так же проверяют число эшерихий.
• Третья степень: на этой стадии резко снижены или вообще отсутствуют лактофлоры, бифидофлоры, но преобладают дрожжеподобные грибы и гемолитические стафилококки.
• Четвертая степень: здесь микробиоценоз сильно изменен, количество патогенных микроорганизмов сильно увеличено, выявляется протей.

На результат сильно влияют (в неправильную сторону) прием прибиотиков и антимикробных средств.

Посев спермы

Эякулят проверяют при болезнях урогенитальной области, а так же при подозрении на мужское бесплодие. Бак посев выявляет патогенные микроорганизмы, на которые в дальнейшем направляется основное лечение.

Есть несколько правил сдачи бак посева:

1. Полное исключение половых контактов в течение 7 дней.
2. Категорический запрет на прием алкогольной продукции за 4 дня до анализа.
3. Если мужчиной принимались антибиотики, то посев назначают через 2 недели после окончание приема.
4. Собирать сперму необходимо в контейнер со специальной питательной средой.
5. Перед процедурой необходимо пописать, хорошо на совесть помыть руки с антибактериальным средством, сделать туалет с мылом мочеиспускательного канала. Далее половой член и головку вытереть стерильной салфеткой. Сперму собрать с помощью специальных манипуляций под названием мастурбация. Касаться в этот момент контейнера нельзя. Собирать эякулят нужно в утреннее время.
6. Строго соблюдать время доставки спермы: в течение трех часов после процедуры сбора. Если по определенным причинам материал нельзя доставить в больницу вовремя, то его на время допускается поместить в холодильник. Время нахождения эякулята там не должно превышать 24 часов.
7. В случае если сперму проверяют на микоплазму и уреаплазму, флакончик с материалом помещают в специальную транспортную среду.
8. Анализ спермы обычно готов через неделю после сдачи.

Посев на флору

Так называют забор материала из влагалища. Проводят его сериальными инструментами в условиях больницы. Дискомфорт и неприятные ощущения женщине взятие материала из влагалища не доставит. Однако некоторую боль принесет сбор материала из уретры. Но для своего здоровья эту процедуру придется потерпеть. К тому же нужно быть готовой, что неприятные ощущения повторяться при первом мочеиспускании после мероприятия. Но они довольно быстро отпустят.

Когда бак посев на флору проинформирует о заболевании, доктор назначит соответствующее лечение. После приема препаратов всегда проводится повторный бак посев. По его результатам врач сможет скорректировать назначенную терапию.

Бактериальный посев при беременности

Чаще всего бак посев используется в гинекологии. Особенно при беременности. За все время вынашивания плода женщина множество раз сдает необходимые анализы. В этом списке присутствует и бак посев. Беременным женщинам он показан в обязательном порядке. Анализ также можно сделать еще на этапе планирования будущего ребенка.

При беременности исследуются биологический материал зева, носа и мочи. Анализ позволяет выявить опасные микроорганизмы, которые пагубно повлияют на развитие ребенка.

Не стоит бояться самой процедуры. Материал для исследования забирается гинекологом очень аккуратно.

Известно, что нарушения в формировании плода могут вызвать трихомонады, стафилококк , микоплазмы, хламидии и уреаплазмы. Наличие подобных микроорганизмов может привести даже к смерти плода. Такой грибок, как Кандида, провоцирует воспаление тканей, которые в последствие в родах подвергаются сильным разрывам.

Бакпосев позволяет выявить болезни, которые протекают в латентной форме. Они так же являются опасными как для плода, так и для здоровья самой матери. В случае их выявления проводится необходимое лечение. По его окончанию врач назначает повторное бактериологическое исследование.

В женских консультациях проверяют посев из носа и зева. Анализ необходим для выявления золотистого стафилококка, который является основной причиной возникновения послеродового сепсиса и гнойного мастита. При обнаружении лечение проводят еще до родов.

Исследование мочи беременных в лаборатории позволяет вовремя обнаружить патологию. В этот период нарушается пассаж мочи по естественным путям и в организме создаются все условия для развития вредной микрофлоры. Остановка этого процесса позволяет предупредить пиелонефрит, который часто мучает беременных женщин. Существуют определенные сроки сдачи бак посева мочи. Это время постановки на учет и тридцать шестая неделя беременности. Сдавать анализы придется в несколько раз больше, если у женщины есть к этому показания. Например, болезнь почек, лейкоциты и белок в моче.

Техника проведения бактериологического посева

Всего техник существует несколько. Большинство из них осуществляются с применением следующих инструментов:

• Микробиологическая петля.
• Чашка Петри.
• Специальная петля с пипетками,.
• Шпатели.
• Иглы.

Микробиологическая бактериальная петля является универсальной, так как применяется во всех техниках. Для жидких материалов используют петлю с пипетками.

Последние два инструмента применяют при посеве на чашку Петри. Ее считается особенной. Ее применяют специально для посева на плотную среду. Чашка представляет собой специальный лабораторный сосуд плоской формы небольшой высоты. Изготавливают ее из прозрачного полистирола или стекла. В диаметре чашка Петри может равняться 50-100 мл. Высота ее всегда примерно 15 мл. Чашка Петри может быть двух видов: стеклянной и пластмассовой. Первая предназначения для многоразового использования, а вторую можно применять только один раз. Пластмассовая чашка является более стерильной, так ее доставляют в лабораторию в специальной плотно закрытой упаковке. Стеклянную чашку перед проведением бактериологического исследования всегда тщательно стерилизуют.

Бакпосев проверяют в специальных средах, которые могут быть твердыми или жидкими. Если размножается жидкий материал, то лаборанты используют пробирки.

Техника бактериологического исследования состоит в следующем: чашку Петри приоткрывают, затем наносят на плотную среду биологический материал. Далее начинают наблюдать за ростом этого материала. Бактерии начинают равномерно увеличиваться в количестве, превращаясь в густую полноценную культуру. После чего они начинают делиться на колонии. Спустя некоторое число дней лаборант идентифицирует возбудителя. Параллельно с эти проводя проверку на чувствительность к антибиотикам.

Результат посева

В конце проведенного исследования лаборант должен получить от исследуемого образца две оценки:

• Качественную (есть ли подозреваемый возбудитель в исследуемом биологическом материале).
• Количественную (какая его концентрация обнаружилась).

Качественную оценку расшифровывают с помощью степеней роста. Их выделяют всего четыре.

• Первая степень: небольшой рост на довольно жидкой среде, в твердой среде рост полностью отсутствует.
• Вторая степень: рост возникает на плотной среде (около 10 колоний).
• Третья степень: так же оценивается рост на плотной среде (10-100 колоний).
• Четвертая степень: больше чем 100 колоний.

В случае рассмотрения условно-патогенной флоры первые две степени не считаются болезнями. Скорее всего, это обычная загрязненность биологического материала. Третья и четвертая степень позволяет уже выявить причину заболевания.

Если анализ показал патогенную флору, то в расчет берутся все четыре перечисленных степени.

Количественная оценка принимается условно и определяется в КОЕ. Характеристика означает сообщество бактериальных клеток, которые смогли вырастить в колонию.

Колонии и КОЕ/мл соотносятся следующим образом:

• 103/мл считается 1 колонией;
• 104/мл берется 1- 5 колоний;
• 105/мл это достаточный рост в 5-15 колоний;
• 106/мл считается, что колоний более 15.

Количественная оценка так же важна. Она помогает определить степень обсемененности и провести контроль сделанного лечения.

Существуют примерные сроки готовности результатов посева:

• Флора: 4-7 дней.
• Слизь из носоглотки: 5-7 дней.
• Кал: 4-7 дней.
• Урогенитальный материал: 4-7 дней.
• Кровь на определение стерильности: 10 дней. Однако здесь можно сказать предварительный результат уже через три дня.

Бактериальный посев — это весьма важная процедура, которая дает хорошую информативность о возбудителе болезни человека. Если ее назначил врач, то анализ необходимо обязательно пройти.

Посев различных бактерий представляет собой один из наиболее эффективных и широко распространенных способов, который в настоящее время активно применяется в сфере медицинской микробиологии. Также данный метод незаменим в области биотехнологии, где он играет важную роль в изучении различных свойств как биологического, так и биохимического характера. Под данным методом подразумевается процесс культивирования микроскопических организмов с использованием , различающихся между собой по характеристикам и свойствам.

Бактериологические посевы могут проводиться с целью тщательного исследования отделяемых клеток глаз, половых органов человека, а также с целью максимально точного анализа крови, мочи или кала. Также выполняются бактериальные посевы спермы и мокроты для исследования. Довольно часто встречается процедура посева на .

Какими бывают среды для питания бактерий

При выборе среды для осуществления посева в первую очередь следует ориентироваться на характер содержания, присущего бактериям, которые являются главным объектом исследования. В том случае, если необходимо получить изолированные , а также определить чистую культуру, следует выполнять посев на плотные питательные среды.

Но если материал, подверженный исследованию, содержит в себе не очень большое количество микроорганизмов, можно в этих целях использовать жидкую питательную среду.

Существует несколько разновидностей питательных сред, в которых осуществляется бактериальный посев. Итак, принято различать простые и специальные среды, а также элективные и дифференциально-диагностические. Каждая категория сред питания отличается своими индивидуальными особенностями и характеристиками.

В каких случаях пациентам назначают анализ мочи с посевом бактерий?

Проведение анализа с бактериальным посевом мочи является актуальным в нескольких случаях:

• при наличии инфекционных заболеваний органов мочевыводящей системы;
• при заболевании сахарным диабетом;
• при беременности;
• с целью уточнения диагноза, если заболевание носит нетипичный характер.

Для проведения этого вида анализа требуется утренняя порция мочи пациента, приблизительное количество которой составляет от трех до пяти миллилитров. Перед сбором мочи на анализ пациент должен обязательно провести соответствующие гигиенические процедуры, однако применять при этом средства с антисептическими свойствами нельзя. Доставку собранной мочи для анализа необходимо производить в кратчайшие сроки. С этой целью применяется стерильный одноразовый контейнер, который гарантирует правильную транспортировку и максимально точные результаты.