1. En permanent beredning studerades vid låg förstoring, men vid övergång till hög förstoring är föremålet inte synligt, även med korrigering med makro- och mikrometerskruvar och tillräcklig belysning. Det är nödvändigt att avgöra vad detta kan bero på?
2. Preparatet placeras på mikroskopbordet, som har en spegel vid basen av stativbenet. Det är svagt artificiellt ljus i aulan. Objektet är tydligt synligt vid låg förstoring, men när man försöker undersöka det med en förstoring av x40-linsen är objektet inte synligt i synfältet, en mörk fläck är synlig. Det är nödvändigt att avgöra vad detta kan bero på?
3. Studieförberedelserna var skadade: glasskivan och täckglaset var trasiga. Förklara hur detta kunde hända?
4. Mikroskopets totala förstoring är 280 i det ena fallet och 900 i det andra. Förklara vilka linser och okular som användes i det första och andra fallet och vilka föremål de låter dig studera?
5. Du har fått en permanent förberedelse för undersökning av föremålet vid hög förstoring av mikroskopet. Hur ska preparatet placeras för att kunna se föremålet i hög förstoring? Förklara varför felaktiga manipulationer med provet endast kan upptäckas vid hög förstoring.
6. Förklara vilka framtidsutsikter som kan förvänta sig en cell av epitelvävnad som inte har centrioler?
7. En 7-faldig endoreduplicering inträffade i den diploida cellen.
Hur mycket ärftligt material har hon?
8. En av de grundläggande inledande slutsatserna av klassisk genetik är idén om jämställdheten mellan de manliga och kvinnliga könen i överföringen av ärftlig information till avkomman. Bekräftas denna slutsats av en jämförande analys av hela mängden ärftlig information som förs in i zygoten av spermierna och ägget?
9. Efter att cellen lämnat mitosen inträffade en mutation i genen som bär programmet för syntesen av helikasenzymet.
Hur kommer denna händelse att påverka cellens mitotiska cykel?
10. Efter befruktningen bildades en 46,XX-zygot, av vilken en kvinnlig kropp skulle bildas. Men under den första mitotiska uppdelningen (fragmenteringen) av denna zygot i två blastomerer, delade sig inte en av de två X-kromosomerna i två kromatider och flyttade sig helt till polen i anafas. Beteendet hos den andra X-kromosomen passerade utan avvikelser från normen. Alla efterföljande mitotiska celldelningar under embryogenesen fortsatte också utan kränkningar av mitosmekanismen.
Vad blir kromosomuppsättningen av celler hos en individ som utvecklas från denna zygot och (förmodligen) de fenotypiska egenskaperna hos denna organism?
11. Det är välkänt att identiska (monozygota) tvillingar är genetiskt identiska. Enligt fenotypen, under det normala förloppet av de cytologiska processerna för deras bildning och utveckling under samma miljöförhållanden, liknar de varandra "som två droppar vatten."
Kan enäggstvillingar vara av olika kön - en pojke och en flicka? Om de inte kan, varför då? Och om de kan, så som ett resultat, vilka är störningarna i den delande zygotens mitotiska cykel?
2. Situationsuppgifter på ämnet "Molekylära grunder för ärftlighet och variabilitet"
Genom - Allmänna frågor
1. Förklara orsaken till situationen där genen från en eukaryot cell, som upptar en DNA-region på 2400 baspar, kodar för en polypeptid som består av 180 aminosyrarester.
Svar: För att koda för 180 aminosyrarester räcker det med 540 nukleotider (180 tripletter) av DNA-mallkedjan. Plus samma mängd - kodningskedjan. Totalt - 1080 nukleotider eller 540 par nukleotider.
2. Vid analys av nukleotidsammansättningen av bakteriofag-DNA M 13, påträffades följande kvantitativa förhållande av kvävehaltiga baser: A-23%, G-21%, T-36%, C-20%. Hur kan man förklara orsaken till att den likvärdighetsprincip som Chargaff fastställt i detta fall inte iakttas?
Svar: Anledningen är att M13-bakteriofagen (som de flesta fager) innehåller enkelsträngat DNA.
Ett mikroskop använder den förstorande kraften hos konvexa linser för att förstora mycket små föremål. På fig. P.2.3 visar ett mikroskop med detaljer om dess struktur. Ett mikroskop är ett dyrt instrument, så du måste hantera det försiktigt och försumma inte följande regler:
1. Förvara mikroskopet i en låda (eller under en huva) för att skydda det från damm.
2. Ta ut den ur lådan med båda händerna och lägg tillbaka den försiktigt för att undvika att skaka.
3. Linserna måste vara rena, för detta måste de torkas av med en tygbit.
4. Mikroskopet ska alltid fokuseras genom att röret flyttas upp från provet. Annars är det mycket lätt att skada preparatet.
5. Håll båda ögonen öppna och titta med dem i tur och ordning.
Ställa in mikroskopet för att arbeta vid låg förstoring
1. Placera mikroskopet på ett bord och sätt dig i en bekväm position. Föremålet som ska undersökas på mikroskopbordet måste vara belyst. För att göra detta, använd en speciell belysning, ljus från ett fönster eller från en bordslampa. I de två sista fallen används den konkava ytan på spegeln under objektsbordet. Med hjälp av en spegel riktas ljuset genom ett hål i scenen. Om en lämplig kondensor finns tillgänglig används en plan spegelyta för att rikta ljus genom den.
2. Använd den grova justeringsskruven för att lyfta upp mikroskopröret och vrid tornet tills objektivet med låg förstoring (× 10 eller 16 mm) passar in i spåret i röret (du hör ett klick).
3. Placera provet du ska undersöka på mikroskopbordet så att materialet under täckglaset är ovanför mitten av hålet i mikroskopbordet.
4. Titta på scenen och provet från sidan, sänk ner röret med den grova justeringsskruven tills lågeffektobjektivet är cirka 5 mm från provet.
5. Medan du tittar genom mikroskopet, vrid på den grova justeringsskruven tills objektet är i fokus.
Ställa in mikroskopet för hög förstoring
1. När man arbetar med en lins med hög förstoring behövs artificiellt ljus för att skapa tillräcklig belysning. För att göra detta, använd en bordslampa eller en speciell illuminator för ett mikroskop med en frostad glödlampa. När du arbetar med en glödlampa är det nödvändigt att placera ett pappersark mellan den och mikroskopet. Vänd spegeln upp och ner så att ljuset reflekteras tillbaka in i mikroskopet.
2. Fokusera kondensorn utan att ta bort provet från scenen. Höj kondensorn så att avståndet mellan den och scenen inte är mer än 5 mm. Medan du tittar genom mikroskopet, vrid på den grova justeringsskruven tills objektet är i fokus. Fokusera nu kondensorn tills lampbilden överlagras exakt på förberedelsen. Placera kondensorn något ur fokus så att bilden av lampan försvinner. Nu ska belysningen vara optimal. Ett membran är inbyggt i kondensorn. Den reglerar storleken på hålet genom vilket ljuset passerar. Detta hål ska öppnas så brett som möjligt. Därmed uppnås bildens maximala klarhet (se fig. A.2.3).
3. Vrid tornet tills objektivet med hög förstoring (×40 eller 4 mm) passar in i skåran. Om fokus redan har ställts in på låg förstoring, kommer en vridning av tornet automatiskt att placera linsen med hög förstoring ungefär i fokus. Fokusera alltid genom att flytta linsen uppåt med finjusteringsskruven.
4. Om fokus inte etableras när du flyttar linsen med linser med hög förstoring, gör följande: titta på scenen från sidan, sänk ner mikroskopröret tills linsen nästan nuddar preparatet. Titta på reflektionen av objektivlinsen på förberedelsen och se till att linsen nästan vidrör sin reflektion.
5. Medan du tittar in i mikroskopet och vrider på finjusteringsskruven, höj sakta objektivet tills bilden är i fokus.
Öka
Förstoring av ett föremål i mikroskop sker med hjälp av ett okular och en objektivlins (tabell A.2.1).
Oljenedsänkning
För att få högre förstoring än med en normal högförstoringslins måste en oljedoppningslins användas. Förmågan hos en lins att samla ljus förbättras avsevärt om vätska placeras mellan objektivlinsen och täckglaset. Vätskan måste ha samma brytningsindex som själva linsen. Därför används vanligtvis cederolja som vätska.
1. Lägg preparatet på scenen och fokusera bilden på samma sätt som när du arbetar med en normal hög förstoring. Byt ut den högförstorade linsen mot en oljesänkningslins.
2. Droppa en droppe cederolja på ett täckglas direkt ovanför föremålet som studeras.
3. Fokusera bilden igen, nu med låg förstoring, vrid sedan tornet för att montera oljedoppningslinsen så att dess spets nuddar oljedroppen.
4. Medan du tittar genom mikroskopet, fokusera linsen mycket noggrant med finjusteringsskruven. Kom ihåg att linsens fokalplan endast är 1 mm från täckglasets yta.
5. När du är klar, torka av oljan från linsen med en mjuk trasa.
| 1. | Tvätta och torka händerna |
| 2. | Sätt på handskar |
| 3. Förbereda mikroskopet för arbete: | |
| 3.1. | Ställ in mikroskopet på skrivbordet på ett avstånd av 3-5 cm från kanten, rulla ut sladden, sätt i stickkontakten i uttaget. |
| 3.2. | Ställ in lågeffektlinsen (8x) på ett avstånd av cirka 1 cm (brännvidd för lågeffektlinsen) |
| 3.3. | För kondensorn i arbetsläge, öppna membranet något. |
| 3.4. | För kikarhuvudet i arbetsläge |
| 3.5. | Slå på belysningsinstrumentet |
| 4. Arbeta med låg och medelstor förstoring: | |
| 4.1. | Placera provet på scenen med täckglaset uppåt. |
| 4.2. | Hitta fokus för låg förstoring genom att flytta makrometerskruven |
| 4.3. | Tänk på förberedelserna, välj området som ska studeras vid högre förstoring och placera det i mitten av synfältet |
| 4.4. | Utan att ändra fokus (utan att höja röret), vrid tornet och installera ett starkare objektiv (40x). |
| 4.5. | Höj kondensorn, öppna membranet |
| 4.6. | Fokusera objektet med mikrometerskruven genom att vrida det ett halvt varv framåt eller bakåt |
| 5. Slutförande av arbete | |
| 5.1. | Stäng av ljuset, ställ in revolvern på låg förstoring, ta bort preparatet från scenen, stäng membranet, sänk kondensorn, sänk ner röret, för ihop okularen i kikarfästet |
| 5.2. | Dra ut sladden från uttaget, linda den försiktigt runt mikroskopets bas. Sätt ett lock på mikroskopet. |
| 5.3. |
3- preparatet som utarbetats av laboratorieassistenten är av dålig kvalitet, eftersom innehåller mörkbruna klumpar. Denna artefakt (pigmentkorn) bildades som ett resultat av reaktionen mellan surt formalin och hemoglobin.
4- För att ta bort pigmentet måste sektioner placeras:
i 1-5% ammoniaklösning (i 15-20 minuter),
70 % alkohol (i 15-20 minuter),
1% KOH i 80° alkohol (10 min).
Sektionerna sköljs sedan med vatten.
Efter att ha färgat den avparaffinerade sektionen med hematoxylin, var den medicinska laboratorieteknikern missnöjd med resultatet: bakgrunden för beredningen var mörk, kärnornas struktur var inte synlig.
ÖVNING 1
- Ange vilket stadium av beredningsfärgning som utfördes på ett otillfredsställande sätt; förbereda arbetsplatsen för färgningsförberedelser
- Förbered förberedelser för färgning
- Färga objektglaset med hematoxylin och eosin.
- Berätta om reglerna för arkivering av histologiska preparat
1. Preparatets mörka bakgrund och kärnornas luddiga struktur kan uppträda med dålig differentiering av preparatet med saltalkohol.
2-3 avparaffinering och färgning av preparat med hematoxylin-eosin
| 1. | Tvätta och torka händerna |
| 2. | Sätt på handskar |
| 3. Förbered arbetsplatsen: | |
| 3.1. | Förbered bricka, servetter, timglas, paraffinskivor |
| 3.2. | Placera ett stativ på brickan |
| 3.3. | Gör ett batteri för avvaxning genom att ordna lösningarna i följande ordning: xylen (1) - xylen (2) - alkohol 100 - alkohol 96 (1) - alkohol 96 (2) - alkohol 70 destillerat vatten |
| 3.4. | Gör ett batteri för färgning genom att ordna lösningarna i följande ordning: destillerat vatten - hematoxylin - destillerat vatten - kranvatten - eosindestillerat vatten |
| 4. avvaxning | |
| 4.1. | Placera sektioner i xylenlösning 1-2 i 3-5 minuter i varje |
| 4.2. | Utför sektioner på ett batteri av alkoholer med sjunkande koncentration |
| 4.3. | Skölj sektioner i destillerat vatten. |
| 5. färgning av sektioner med hematoxylin-eosin | |
| 5.1. | Överför avparaffinerade sektioner till destillerat vatten. |
| 5.2. | färga med hematoxylin 2-5 min |
| 5.3. | skölj med destillerat vatten - 1 min |
| 5.4. | skölj med kranvatten - 3-5 min |
| 5.5. | färga med 1% eosinlösning - 0,5-1 min |
| 5.6. | skölj snabbt med destillerat vatten |
| 6. Slutförande av arbete | |
| 6.1. | Plocka isär batteriet, sätt flaskorna med lösningar på plats, kassera använda våtservetter |
| 6.2. | Ta av handskar och lägg i desinfektionsmedel |
4. arkivering
Efter att ha avslutat skärningen av bitar från det kirurgiska materialet placerade den medicinska laboratorieteknikern alla instrument, använda handskar och det återstående materialet i en desinfektionslösning.
ÖVNING 1
- Utvärdera laboratorieassistentens agerande och förbered arbetsplatsen för att ta kirurgiskt material
- Markera och fixa materialet
- Desinficera använda redskap och verktyg
- Berätta om reglerna för arkivering av det material som finns kvar efter studien (vått arkiv)
1. Medicinsk laboratorietekniker fel. Resterande material ska läggas i 10% neutralt formalin (våtarkiv).
2-3-tagning, märkning och fixering av materialet
| 1. | Tvätta och torka händerna |
| 2. | Sätt på handskar |
| 3.1. | bred ut en vaxduk (lägg en bricka) |
| 3.2. | lägg på en vaxduk (bricka): en behållare med bred mun och ett inslipat lock fyllt med 10 % neutralt formalin; histologiska kassetter, pincett |
| 4. märkning och fixering av materialet | |
| 4.1. | öppna kassetten (lägg en gasbinda på brickan) |
| 4.2. | lägg i kassetten (på en servett) en bit material som läkaren klippt ut |
| 4.3. | Förbered en pappersetikett: skriv med en enkel penna det serienummer som materialet är registrerat under i journalen |
| 4.4. | Placera etiketten i kassetten (på en servett med material) |
| 4.5. | Stäng kassetten, du ska höra ett klick (knyt en servett). |
| 4.6. | Placera kassetten (servetten) med materialet i en behållare med bred mun fylld med 10 % neutralt formalin. I det här fallet bör fixeringsmedlets volym överstiga volymen av materialet som ska fixeras med 10-20 gånger. |
| 4.7. | Stäng behållaren med ett lock och låt stå under huven under den tid som krävs för fixering (1 dag). |
| 5. Slutförande av arbete | |
| 5.1. | lägg de använda instrumenten i en behållare för desinfektion, exponering 1 timme. |
| 5.2. | torka av vaxduken (brickan) med en trasa indränkt i en desinfektionslösning. |
| 5.3. | kasta trasorna i en behållare med en desinfektionslösning, exponering 1 timme. |
| 5.4. | ta bort gummihandskar, doppa dem i en behållare med desinfektionsmedel, exponering 1 timme. |
4. vått arkiv
En medicinsk laboratorietekniker fick i uppdrag att hälla kirurgiskt material i paraffin. För detta ändamål använde han följande handlingsalgoritm: alkohol 70% - alkohol 96% (1) - alkohol 96% (2) - alkohol 100% - xylen (1) - xylen (2) - en blandning av xylen med paraffin (vid 37ºC) - paraffin (56ºC).
2. Demonstrera materialuttorkningsteknik
3. Bädda in material i paraffin
4. Berätta om reglerna för arkivering av paraffinblock
Medicinsk laboratorietekniker använde den korrekta algoritmen för åtgärder
1-3 packning av materialet och häll det i paraffin.
| 1. | Tvätta och torka händerna |
| 2. | Sätt på handskar |
| 3. Förbered arbetsplatsen: | |
| 3.1. | Förbered ett batteri för uttorkning och komprimering av materialet |
| 3.2. | Förbered verktyg. |
| 3.3. | Förbered formar för hällning. |
| 3.4. | Förbered en behållare med kallt vatten för att snabbt kyla paraffinet. |
| 4. uttorkning | |
| 4.1. | Lägg det tvättade materialet i 70 % alkohol. |
| 4.2. | Demonstrera hur material överförs från ett reagens till ett annat, ange hålltiden i varje reagens. |
| 5. Häll material | |
| 5.1. | Ta bort paraffinbehållare (andra delen) och fyll paraffin från termostaten. |
| 5.2. | Placera paraffinbehållarna i ett vattenbad. |
| 5.3. | Överför materialet till mitten av pappersformen med en varm pincett. |
| 5.4. | Fyll formen med paraffin för hällning. |
| 5.5. | Sänk ned formarna till brädden i kallt vatten tills en hinna syns på ytan. |
| 5.6. | Doppa formen helt i vatten. |
| 6. Slutförande av arbete | |
| 6.1. | Ta bort paraffinbehållarna från termostaten. |
| 6.2. | Kassera kassetten (gasväv). |
| 6.3. | Ta av handskar och lägg i desinfektionsmedel. |
4.arkivering
När man gjorde paraffinsnitt från ett hudblock med hår, upplevde en medicinsk laboratorietekniker svårigheter: sektionerna var täckta med ränder och revs sönder.
1. Nämn möjliga orsaker till svårigheten att skära av detta block.
2. Är det möjligt att fixa denna artefakt?
3. Teknik för att applicera ett självhäftande medium på objektglas. Vad kan användas som lim vid limning av sektioner på glasskivor?
1. Orsakerna till brott och ränder på paraffinmedia kan vara:
Skärytans defekt
Fastsättning av paraffin på bladets skärkant
Paraffin av dålig kvalitet
2. För att eliminera artefakten bör du:
Flytta bladet lite och se om platsen för reporna på snittet har ändrats med det. Om reporna också har förskjutits, byt sedan ut bladet.
· Rengör bladet med en borste doppad i xylen. Vid borstning ska borsten flyttas uppåt bort från incisalskanten, men aldrig nedåt på incisalkanten.
· Provduplikat bör avkalkas eller fyllas på igen.
3. Som häftmaterial för limning av sektioner på en glasskiva kan du använda färdigt gelatinlim för sektioner eller förbereda ditt eget häftmedium baserat på serum eller äggvita med glycerin.
När man började färga paraffinsektionen från en bit av sköldkörteln, glömde den medicinska laboranten att avparaffinera.
1. Kan ett icke-avparaffiniserat preparat färgas? Vad är syftet med avparaffinering?
2. Är det möjligt att rätta till ett sådant fel?
3. Typer av de mest använda histologiska fläckarna.
1. Ett icke-avparaffiniserat preparat kan inte färgas. Avvaxning används för att ta bort paraffin från sektionen. Det avvaxade preparatet kan torkas och förvaras. Paraffinlösningsmedel - xylen ska bytas efter bearbetning av 100-200 sektioner.
2. Korrigering är inte möjlig.
3. I histologisk praxis används basiska (alkaliska), sura och neutrala färgämnen. Grundläggande färgämnen fläckar strukturer av sur natur. Först och främst cellkärnor (DNA, kromatin, nukleolärt RNA). Denna färgning kallas basofil. Bland dessa färgämnen är det vanligaste kärnfärgämnet hematoxylin. Cytoplasmatiska strukturer med grundläggande egenskaper färgas med sura färgämnen. Det vanligaste sura färgämnet är eosin. Bland de neutrala färgämnena är det vanligaste färgämnet Sudan (Sudan III, IV), som löser sig i fetter. Det används för att upptäcka fettinneslutningar i cellernas cytoplasma.
| tecken | prokaryoter | eukaryoter |
| 1. Morfologiskt bildad och separerad från cytoplasman av kärnans kärnmembran. | ||
| 2. Antal kromosomer | ||
| 3. Kromosomerna är cirkulära | ||
| 4. Kromosomerna är linjära | ||
| 5. Ribosomsedimentationskonstant | ||
| 6. Lokalisering av ribosomer: - utspridda i cytoplasman - fäst till det endoplasmatiska retikulum | ||
| 7. Golgi-apparat | ||
| 8. Lysosomer | ||
| 9. Vakuoler omgivna av ett membran | ||
| 10. Gasvakuoler som inte är omgivna av ett membran | ||
| 11. Peroxisomer | ||
| 12. Mitokondrier | ||
| 13. Plastider (i fototrofer) | ||
| 14. Mesosomer | ||
| 15. Mikrotubulisystem | ||
| 16. Flagella (om sådana finns): - diameter - i diameter har de ett karakteristiskt arrangemang av mikrotubuli "9 + 2" | ||
| 17. Membran innehåller: - grenade och cyklopropanfettsyror - fleromättade fettsyror och steroler | ||
| 18. Cellväggar innehåller: - peptidoglykan (murein, pseudomurein) - teichoinsyror - lipopolysackarider - polysackarider (cellulosa, kitin) | ||
| 19. Cellreproduktion sker genom: - enkel delning - mitos | ||
| 20. Karakteristisk uppdelning av protoplasten genom inre membran i funktionellt olika fack | ||
| 21. Tredimensionellt cytoskelett, inkluderar mikrotubuli, mellanliggande och aktinfilament | ||
| 22. Kommunikation mellan fack utförs på grund av cyklos, endo och exocytos | ||
| 23. Förekomst av endosporer |
5.4. Slutlig kontroll av kunskap:
- Frågor om ämnet för lektionen:
1. Förklara kärnan i vetenskapen "Biologi" och dess betydelse inom medicin.
2. Motivera varför vi studerar människan som ett föremål för medicin, först och främst som en representant för djurvärlden.
3. System för klassificering av levande organismer.
4. Idén om icke-cellulära och cellulära livsformer.
5. Begrepp om pro- och eukaryoter.
6. Mångfald av cellulära livsformer.
7. Idén om att förstora enheter, historien om deras upptäckt och förbättring.
8. Vikten av att förstora instrument i utvecklingen av biologi och medicin.
- Testuppgifter:
1. Stadium avser en del av mikroskopet
1) mekanisk
2) optisk
3) belysning
4) dissekera
2. Komponenterna i mikroskopets belysningsdel är ordnade
1) i uttagen på revolvern
2) på toppen av röret
3) vid basen av stativfoten
4) på ämnestabellen
3. Syfte med makrometerskruv
1) flytta hållaren med okularet i vertikal riktning
2) flytta hållaren med okularet i horisontell riktning
3) flytta bordet med objektet i vertikal riktning
4) flytta bordet med objektet i horisontell riktning
4. Förstoringen av okularet på Biolam-mikroskopet kan vara
5. Förstoring av nedsänkningsobjektivet
- Lösning av situationsproblem:
Uppgift 1
En permanent beredning studerades vid låg förstoring, men vid övergång till hög förstoring är föremålet inte synligt, även med korrigering med makro- och mikrometerskruvar och tillräcklig belysning. Det är nödvändigt att avgöra vad detta kan bero på?
Uppgift #2
Preparatet placeras på mikroskopbordet, som har en spegel vid basen av stativbenet. Det är svagt artificiellt ljus i aulan. Objektet är tydligt synligt vid låg förstoring, men när man försöker undersöka det med en förstoring av x40-linsen är föremålet inte synligt i synfältet, en mörk fläck är synlig. Det är nödvändigt att avgöra vad detta kan bero på?
6. Läxor för att förstå ämnet för lektionen(enligt riktlinjerna för extracurricular arbete på lektionens ämne)
1. Beredning av mikropreparat av representanter för prokaryota (bakterieceller) och eukaryota organismer (nervceller, lökhudceller).
- Obligatoriskt
1. Biologi i 2 böcker. Medicinsk lärobok. specialist. universitet / red. V.N. Yarygina. M.: Högre. skola, 2005.
2. Guide till praktiska övningar i biologi: lärobok / red. V.V. Markin. M.: Medicin, 2006.
- Ytterligare
1. Allmän och medicinsk genetik: lärobok / ed. V.P. Shchipkov. M.: Akademin, 2003.
2. Ginter E.K. Medicinsk genetik: lärobok. M.: Medicin, 2003.
3. Bochkov N.P. Klinisk genetik: lärobok. M.: GEOTAR-Media, 2004.
4. Severtsov A.S. evolutionsteorin. M.: Vlados, 2005.
5. Zhimulev I.F. Allmän och molekylär genetik: en lärobok. Novosibirsk: Sibuniverizd., 2007.
7. Grigoriev A.I. Människoekologi: lärobok. M.: GEOTAR-Media, 2008.
8. Chernova N.M. Allmän ekologi: lärobok. M.: Bustard, 2004.
- Elektroniska resurser
1. Elektroniskt bibliotek om ämnet biologi. Moskva: Rysk läkare, 2003.
2. IHD KrasGMU
4. DB Medicin
5. DB Medicinska Genier
Moskva: Agropromizdat, 1988. - 271 s.
ISBN 5-10-000614-5
Ladda ner(Direktlänk) :
praktiumpocitologii1988.djvu Föregående 1 .. 57 > .. >> Nästa
Ett permanent mikrotompreparat med längsgående sektioner av rötterna betraktas först vid låg förstoring av mikroskopet. En mössa är tydligt synlig i spetsen av roten, som skyddar tillväxtkonen från skador under tillväxten.
i jorden. Detta följs av en kon av rottillväxt, eller en zon med celldelning (ca 2 mm). Bakom tillväxtkonen finns en förlängningszon, där cellerna är långsträckta, och sedan en absorptionszon med rothår. Mitos studeras på de meristematiska cellerna i rottillväxtkonen, där det finns många delande celler. Meristemet består av rader av rektangulära celler. Varje rad med celler kommer från en enda cell.
Efter att ha undersökt roten vid låg förstoring, bör preparatet ses med ett 40X objektiv.
Interfas. På konventionella permanenta preparat kännetecknas kärnans interfastillstånd av en delikat kromatinstruktur. Kromosomer vid denna tidpunkt är starkt despiraliserade och upptäcks inte. Kärnorna har en rundad form och en homogen granulär struktur. Av de andra komponenterna i kärnan är nukleolerna tydligt synliga. När man använder vissa nukleära fixativ, som Brodsky, och färgningspreparat med hematoxylin kan man med nedsänkning i mikroskop (lins 90X) i kärnan i en växtcell se ett kromatinnätverk och stora kromatinkorn som bildar kromocenter.
Efter avslutad interfas går celler in i mitos. Celldelning börjar vanligtvis med transformationer i kärnan.
I profas (fig. 47) ökar kärnan, och kromosomtrådar blir tydligt synliga i den, vilket i denna
Ris. 47. Mitos i cellerna i lökroten Allium sera (mikrotomipreparat):
1 profas; "2 - metafas; I - anafas; 4 - kroppsfas; 5 - interfas.
tiden är redan spiraliserad. Varje kromosom efter fördubbling i interfas består av två systerkromatider förbundna med en centromer. I slutet av profas försvinner vanligtvis kärnmembranet och nukleolerna. På förberedelser kan man alltid hitta tidiga och sena profaser och jämföra dem med varandra Kromosomala trådar är tydligare synliga i sen profas, och det är ofta möjligt att märka att de fördubblas.
Metafas Efter att kärnhöljet försvunnit ser man att kromosomerna har nått maximal kondensation, blivit kortare och rör sig mot cellens ekvator, som ligger i samma plan. Denna period i mitos kallas metafas. Cellen har redan en mitotisk (akromatisk) spindel, bestående av stödjande och dragande filament. Den första av dem sträcker sig från en pol till en annan, och den andra förbinder kromosomernas centromerer med polerna.
På preparat färgade med hematoxylin är den mitotiska spindelns filament inte alltid synliga, eftersom detta färgämne är nukleärt. Men i träningsfilmen och på andra preparat syns det tydligt att varje kromosom, som är fäst vid den mitotiska spindeln, består av två parallella kromatider.
Den dubbla kromosomen i metafas är vanligtvis placerad vinkelrätt mot den mitotiska spindelns filament och på lika avstånd från polerna. Centromererna för alla kromosomer är i samma ekvatorialplan, vilket är mycket bekvämt för att räkna kromosomer och studera deras morfologi. "
Mikrotompreparat för kromosomräkning görs vanligtvis av rottvärsnitt så att metafasen är synlig från polen. I denna position ser man tydligt att kromosomerna är belägna på ett visst avstånd från varandra. Vid denna tidpunkt kan de skissas och räknas.
Anafas börjar med delningen av centromeren, och sedan sker separationen av kromatiderna. Systerkromatider för varje kromosom divergerar till olika poler. Det är så den exakta fördelningen av det genetiska materialet sker och vid varje pol finns samma antal kromosomer som den ursprungliga cellen hade innan de duplicerades. Till exempel har råg 14 kromosomer i sina somatiska celler. I metafas, hon
14 dubbla (dikromatid) "kromosomer. I anafas, efter att systerkromatiderna divergerar vid polerna, finns det återigen 14 kromosomer vid polerna.
Efter separation av centromeren får varje kromatid funktionerna hos en oberoende kromosom.
Förflyttningen av kromatider till polerna sker på grund av sammandragningen av de dragande filamenten och förlängningen av de stödjande filamenten i den mitotiska spindeln. När man tittar på en träningsfilm är det tydligt att denna process är väldigt snabb i jämförelse med andra
olika faser och är svårare att fånga. Därför är anafas mindre vanligt på preparat än profas.
I telofas genomgår kromosomerna vid varje pol dekondensering, det vill säga en process motsatt vad som sker i profas. Kromosomernas konturer förlorar sin klarhet, den mitotiska spindeln förstörs, kärnhöljet återställs och nukleoler uppträder. Sålunda, efter olika strukturella transformationer, delades den långsamt rörliga kärnan i två dotter. Under telofas bildas en cellvägg från fragmoplasten, som delar upp hela innehållet i cytoplasman i två lika delar - cytokines uppstår. Så här slutar mitosen.
Varaktigheten av individuella faser av mitos kan bedömas från in vivo-observationer. Det har fastställts att i ärtfröfrukten varar profas 40 minuter, metafas - 20, anafas - 12, telofas - 1,10 minuter, dvs den första och sista fasen av mitos är de längsta. Hela mitosen varar ca 3 timmar.. Den mitotiska cykelns varaktighet är flera gånger längre. Så i hästbönor (Vicia fab a) varar hela mitotiska cykeln 30 timmar, med mitos 4 timmar och interfas - 26 timmar, varav perioden G \ - 12 timmar, S - 6 timmar, C2 - 8 timmar I grönt varar den kortaste mitotiska cykeln i vissa celler 8 timmar, och de flesta celler går igenom den på 10-12 timmar. Av de tre perioderna av interfas är Gi-perioden den mest varierande i varaktighet. Mitosens kinetik beror på olika interna och externa faktorer, nivån av iloidalitet, miljöns pH, hormonell aktivitet, temperatur, ljusförhållanden, etc.