Причем некоторые виды простейших могут выживать в форме цисты до нескольких лет.
Простейшие обитают в тонком либо толстом кишечнике человека. Они являются одноклеточными микроорганизмами. Способы их проникновения в тело хозяина – сырая вода, немытые руки и еда.
Чтобы обнаружить простейших проводится исследование каловых масс на наличие их цист. Они могут быть выявлены в экскрементах и в вегетативной форме, когда одноклеточные микроорганизмы подвижны и активны. Но выходя из кишечника микроорганизмы утрачивают собственную структуру и стремительно погибают.
Когда простейшие принимают форму цисты, они покрываются специальной оболочкой. В таком виде диагностировать их присутствие в фекалиях человека намного проще. Но какие типы одноклеточных принимают форму цист, и как их можно обнаружить в кале?
В человеческих экскрементах можно выявить массу разновидностей простейших. Зачастую в кишечнике локализуются цисты таких классов:
- амебиаз;
- жгутиковых;
- реснитчатых;
- кокцидийных;
- амебных.
Амебиаз. Такое заболевание провоцирует дизентерийная амеба. Этот простейший микроорганизм обитает в кишечнике хозяина и выводится из него в качестве цисты либо трофизоита.
Но большая часть амеб – это не патогенные микроорганизмы. Такими являются Гартмана, Бючли, кишечная амеба, entamoeba coli и цисты en nana. Определить их наличие в каловых массах не просто.
Но циста дизентерийной амебы выявляется легче. Если она была найдена в фекалиях, то свидетельствует о развитии у человека дизентерийного либо язвенного колита.
В кале вывеются такие формы амеб:
- просветная;
- тканевая;
- инцистрованная.
Если в процессе диагностики будут выявлены цисты просветной амебы, то это указывает, что болезнь приобрела хроническую форму.
Осложнениями амебиаза являются:
- кровотечение из заднего прохода;
- перитонит;
- абсцесс кишечника;
- опухолевидные образования.
Балантидиаз. Балантидий – околоточный микроорганизм, принадлежащий к реснитчатым, который живет в кишечнике.
Примечательно, что иногда цисты балантидий выявляют в кале у здоровых людей.
Лямблии принадлежат к жгутиковым. Их цисты очень живучие, ведь им не страшны низкие либо высокие температуры.
Во внешней среде цикл их жизнедеятельности довольно длинный. Причем в активной форме в неблагоприятных условиях они могут находиться не больше 30 минут.
Цисты лямблий обладают овальной грушевидной формой. Их ширина (6-10 микрон) и длина (6-10 микрон) может быть различной.
Благоприятной средой для существования активной формы считаются мочевыводящие пути, тонкий кишечник, двенадцатиперстная кишка и мочевой пузырь.
В основном лямблиоз диагностируется в возрасте до 10 лет. При этом гельминтоз протекает тяжело, что сопровождается высыпаниями на коже, похудением, пенистым стулом, потерей аппетита, рвотой и вздутием живота.
Лямблии повреждают слизистую кишечника, механически блокируя проход, что отражается на пищеварении. Таким образом, пища не переваривается и гниет, из-за чего образуется масса бактерий. Все это провоцирует развитие болезней желчевыводящих протоков, поджелудочной железы и желчного пузыря.
Криптоспоридоз. Криптоспоридии – микроорганизмы, вредящие слизистой ЖКТ и дыхательных органов. Оосцисты Cryptosporidium parvum обладают шарообразной формой, диаметром 4.2-5.4 мкм.
У вич инфицированных криптоспоридии обитают во всем ЖКТ, начиная со рта и заканчивая прямой кишкой. К осложнениям криптоспоридоза относятся:
- склерозирующий холангит;
- гепатит;
- холецистит.
Чтобы выявить в фекалиях человека цисты амеба нана и прочие виды простейших, проводится микроскопическое исследование. Для этого у пациента берут биоматериал на анализ, в который добавляют раствор эфира и помещают в центрифугу. Затем центрифугированный материал делят на четыре части.
В оставшемся осадке должны оказаться цисты одноклеточных микроорганизмов. Далее смесь наносится на предметное стекло, окрашиваемое специальным раствором. Таким образом, цисты простейших можно увидеть, используя электронный микроскоп.
Кроме того, чтобы вывить определенные типы одноклеточных для окрашивания стекла используются средства, приготовленные по Грамму. Однако такой анализ в отношении некоторых разновидностей простейших (криптоспоридии) является неэффективным.
Для контролирования терапии анализы, выявляющие наличие цист одноклеточных микробов, делаются в зависимости от вида болезни. Так, при балантидиазе и амебиазе исследование необходимо делать через 48 часов после начала лечения, а в случае лямблиоза – по прошествии семи дней.
В процессе подготовки к анализу нельзя употреблять в пищу продукты, разжижающие стул, а также пить слабительные препараты. Кроме того, за два дня до проведения исследования не рекомендовано использовать масла, ректальные свечи и средства, стимулирующие перистальтику кишечника. Также нельзя кушать красящие продукты.
Исследование на выявление в каловых массах цист простейших рекомендовано детям школьного и дошкольного возраста и людям, которые находились за рубежом.
Также анализы необходимо сдавать в случае употребления некачественной сырой воды (случайно заглатывание при купании в открытом водоеме) и немытой либо плохо термически обработанной пищи.
Препараты нужно пить 4 раза в день. В случае своевременного принятия лечебных мер прогноз заболевания благоприятный.
Амебиаз лечится, исходя из вида инвазии и состояния органов и слизистых тканей пациента. Зачастую лечение заболевания заключается в приеме Нитроимидазола:
- Фасижин;
- Секнидозол;
- Орнидазол;
- Трихопол;
- Метронидозол.
Такие лекарственные средства используются для терапии кишечного амебиаза, а также при всевозможных абсцессах. Пациентам с амебной дизентерией, у которых течение болезни тяжелое, кроме перечисленных препаратов, прописывают антибиотики. Таким образом, можно предупредить гнойные абсцессы.
В случае абсцессов проводится их дренирование через кожные покровы (аспирация). Сегодня амебиаз можно вылечить полностью, но только при условии своевременного лечения. Но для этого необходимо провести раннюю диагностику и выбрать грамотную тактику лечения.
- Нитазоксадин;
- Азитромицин;
- Паромомицин;
- Мепрон.
Нередко это инфекционное заболевание сопровождает диарея. Чтобы от нее избавиться часто применяется Имодиум.
Помимо лекарственной терапии, в обязательном порядке пациенту необходимо придерживаться диеты. Для нормализации работы системы пищеварения врач назначает мукопротекторы и ферментные средства. При этом в процессе терапии важно пить достаточное количество жидкости.
При обнаружении в кале цист лямблий проводится многоэтапное лечение:
- подготовительное;
- основное;
- реабилитационное.
После контакта с животными следует тщательно мыть руки. Для питья и приготовления пищи важно использовать только очищенную воду. Более того, не следует пользоваться чужим полотенцем либо носить белье.
В данной информационной статье мы рассмотрим множество вопросов, связанных с цистами лямблий, а также поговорим о том, как сдать кал на цисты лямблий.
Трофозиты активно перемещаются по тонкому кишечнику, питаются и размножаются характерным способом для всех простейших (деление). Цисты же не зря называются «пассивной формой», так как никакого функционала у них нет. Во внешней среде цисты могут сохранять жизнеспособность до 85 суток, в зависимости от условий жизни. Оптимальный температурный уровень для сохранения жизнедеятельности споровой формы лямблий не превышает 6 градусов (минимум - 2 градуса), а оптимальная влажность внешней среды - 80-100%.
Например, при нахождении споровой формы лямблий в засушливой среде, их смерть наступает в течение суток, а при попадании в открытые пресные водоемы они не теряют жизнеспособности до максимального возможного времени (3, а иногда и 4 месяца). В водопроводе споровая форма может существовать до 3-х месяцев. Влияние ультрафиолета на цисты лямблий не несет негативного эффекта. Также цисты устойчивы к воздействию хлорки. Кипячение для них губительно.
Распространителями лямблиоза являются, преимущественно, больные люди, которые выделяют в процессе дефекации огромное количество инвазионных цист. Для примера: 1 грамм фекалий больного может содержать до 22 миллионов споровых форм лямблий. При несоблюдении индивидуальной гигиены цисты разносятся носителем повсеместно, включая продукты питания, бытовые и гигиенические принадлежности и так далее. Помимо человека, разносчиками цист лямблий могут являются домашние животные (кошки, собаки), морские свинки, кролики и прочие млекопитающие, однако, при попытке искусственного инфицирования цистами крупнорогатого скота заражение не наблюдалось.
Отметим, что последнее время пристальное внимание стало уделяться бобрам, так как считается, что эти животные являются распространителями цист. Насекомые также играют роль разносчиков лямблиоза, так как исследования подтвердили наличие цист лямблий в кишечнике навозных жуков, тараканов, мух и других представителей насекомых.
Как вы понимаете, выделение цист во внешнюю среду происходит в процессе естественной дефекации. Как правило, после заражения должно пройти 10-12 суток прежде, чем человек начнет представлять угрозу заражения для окружающих. Однако, при условии попадания в организм большого количества зрелых цист лямблий, данный промежуток времени значительно укорачивается.
Выделение цист вместе с каловыми массами может протекать как беспрерывно (наблюдается в 5% случаев), так и с кратковременными перерывами. Следовательно, этот процесс протекает, как правило, волнообразно.
Как мы говорили ранее, благодаря лабораторным исследованиям постановка диагноза «лямблиоз» не затруднена. Диагноз может быть установлен только после того, как были обнаружены цисты лямблий в кале. Исходя из лабораторных анализов фекалий, также формируется терапевтический курс.
Прежде всего, необходимо предварительно подготовить свой организм для сдачи анализа. В качестве подготовки рекомендуется соблюдать несколько простых правил.
В норме в кале патогенные простейшие не обнаруживаются.
Обнаружение и дифференцирование простейших (отличие патогенных форм от непатогенных) - довольно сложная задача. Большинство одноклеточных организмов встречается в кале в двух формах: вегетативной - активной, подвижной, жизнедеятельной, легко поддающейся вредным воздействиям (в частности, охлаждению) и потому быстро погибающей после выделения из кишечника, и в виде устойчивых к внешним воздействиям цист.
В оформленном кале простейшие, как правило, встречаются лишь в инцистированном состоянии; для обнаружения вегетативных форм необходимо исследовать кал еще в теплом состоянии. Это обусловлено тем, что в остывшем кале вегетативные формы простейших быстро гибнут и мертвыми быстро поддаются действию протеолитических ферментов, вследствие чего теряют характерные особенности своей структуры. Кроме того, при остывании уменьшается, а затем исчезает подвижность простейших - важный вспомогательный фактор при их дифференцировании.
В клинической практике наибольшее значение имеет обнаружение в кале следующих простейших, вызывающих заболевания у человека.
Entamoeba histolytica (дизентерийная амеба) вызывает у человека амебиаз. Относится к классу корненожек и встречается в кишечнике в двух формах: тканевой и просветной. Тканевая форма, называемая также Е. histolytica forma magna, получила свое название вследствие того, что проникает в ткани хозяина и, поселяясь там, вызывает изъязвление стенки кишечника. Наличие в протоплазме амеб эритроцитов является очень важным диагностическим признаком, так как непатогенные формы амеб никогда их не содержат. Просветная форма, или Е. histolytica forma minuta, обитает в просвете кишечника. В стенку кишечника она не внедряется, поэтому не вызывает ее изъязвления и соответствующей клинической картины. Просветная форма амебы обнаруживается у лиц, выздоравливающих от острого амебиаза, у страдающих хронической формой амебиаза и у носителей. Для острого амебиаза характерно обнаружение тканевой формы амебы. Другие формы амебы (кишечная, Гартма-на, Бючли) являются непатогенными для человека.
Этот анализ делается для при подозрении на заражение простейшими и в качестве предварительного анализа перед плановой госпитализацией в стационар, а также при оформлении ребенка в детские учреждения и т.д.
Подготовка к анализу кала
Анализ кала на энтеробиоз (яйца остриц).
Анализ кала делается в случае подозрения на энтеробиоз (заражение острицами) и перед плановой госпитализацией, а также при оформлении ребенка
в детские учреждения. Клиническими проявлениями энтеробиоза являются зуд в области анального отверстия и кишечные расстройства. Возбудитель - острица. Это мелкая нематода (круглый червь), которая обитает в толстом кишечнике, а выползая из прямой кишки, откладывает яйца в складках у заднепроходного отверстия.
Источником заражения является больной человек. Заражаются болезнью через грязные руки. Личинки остриц, прикрепляясь к коже, вызывают воспаление, а зрелые глисты нарушают функции кишечника. Продукты жизнедеятельности этих глистов и, особенно, продукты их распада оказывают токсическое и аллергическое действие.
Подготовка к анализу
Взятие материала должно производиться утром. Перед взятием анализа не следует подмывать ребенка . Медсестра ватной палочкой, смоченной в глицерине, делает соскоб с поверхности перианальных складок и нижних отделов прямой кишки. Палочку помещает в пластиковую пробирку и плотно закрывает крышкой.
В результате анализа помечают не найдены или найдены яйца остриц. В норме они не обнаруживаются.
Анализ кала на яйца гельминтов (яйца глистов).
Подготовка к анализу кала
Кал собирают в одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой и ложечкой в количестве не более 1/3 объема контейнера или в чистую стеклянную баночку– объем не более одной ложки. На контейнере или на банке необходимо разборчиво указать фамилию и инициалы пациента, дату рождения, дату и время сбора материала, который должен быть доставлен в лабораторию в этот же день. Во время сбора избегать примесей мочи, отделяемого половых органов. До отправки в лабораторию материал должен храниться в холодильнике при 4-8 градусов С. На бланке с результатом указывают не обнаружены или обнаружены яйца гельминтов, если обнаружены, то что именно. В норме яйца глистов в кале не обнаруживают.
Исследования кала на скрытую кровь
Анализ делают при подозрении на наличие кровотечения из какого-либо отдела желудочно-кишечного тракта. Используется для выявления «скрытой» крови, не видимой при микроскопическом исследовании. Обладает высокой чувствительностью к гемоглобину – веществу, содержащемуся в красных кровяных клетках эритроцитах. До анализа за три дня исключается из рациона мясо, печень, рыбу яблоки, перец болгарский, шпинат, белую фасоль, зеленый лук, помидоры, все виды зеленых овощей, репа, хрен, свекла, черника, гранаты - это продукты, содержащие железо, а также продукты, окрашивающие кал, а также прием железосодержащих лекарственных средств. Целесообразно применение диеты: Молоко, молочные продукты, каши, картофельное пюре, белый хлеб с маслом, 1-2 яйца всмятку, немного свежих фруктов. Такую пищу дают в течение 4-5 дней. Не рекомендуется также в течение 2-х дней чистить зубы из-за возможности ранения десен. Стул должен быть без клизм и слабительных средств. Для исследования необходимо около 1 чайной ложки кала. В норме скрытая кровь не определяется. Положительная реакция на «скрытую» кровь в кале отмечается при:
- кровотечении из десен;
- кровотечение из варикозных вен пищевода, желудка, кишечника;
- язвенном и воспалительном процессах в желудке, кишечнике;
- геморрагических диатезах - группе болезней, общим проявлением которых является геморрагический синдром (склонность к повторяющимся интенсивным длительным, чаще всего множественным, кровотечениям и кровоизлияниям);
- полипозе – множественных доброкачественных опухолях слизистой оболочки различных отделов кишечника;
Копрограмма
Анализ делается для совокупного описания физического, химического и микроскопического исследования кала. Назначается он для диагностики заболеваний органов пищеварения и оценки результатов проводимого лечения. Исследование кала позволяет диагностировать:
- нарушение кислотообразующей и ферментативной функции желудка;
- нарушение ферментативной функции кишечника;
- нарушение ферментативной функции поджелудочной железы;
- нарушение функции печени;
- наличие ускоренной эвакуации из желудка и кишечника;
- нарушение всасывания в двенадцатиперстной и тонкой кишке;
- воспалительный процесс в ЖКТ;
- дисбактериоз – нарушение нормальной микрофлоры кишечника;
- язвенный, аллергический, спастический колит – воспаление кишечника.
При микроскопическом исследовании определяют основные элементы кала: мышечные волокна, растительную клетчатку, нейтральный жир, жирные кислоты и их соли, лейкоциты, эритроциты, клетки кишечного эпителия, клетки злокачественных новообразований, а также слизь, яйца гельминтов, простейшие.
Подготовка к исследованию
Рекомендована отмена лекарственных препаратов. Нельзя проводить копрологические исследования после клизмы. После рентгенологического исследования желудка и кишечника проведение анализа кала показано не ранее, чем через двое суток, так как это исследование проводится с использованием рентген-контрастных веществ, которые выводятся с калом. Кал собирается в одноразовый пластиковый контейнер с герметичной крышкой и ложечкой-шпателем для отбора пробы или в чистую стеклянную посуду. Следует избегать примеси к калу мочи. Контейнер необходимо доставить в лабораторию в тот же день, а до отправки он должен храниться в холодильнике при температуре 3-5 градусов С. Для детей старше 1 года характерны следующие показатели копрогораммы:
|
Изменение окраски является важным диагностическим признаком многих заболеваний. Так, при механической желтухе, когда прекращается поступления желчи в кишечник, кал обесцвечивается. Чёрный дегтеобразный кал признак кровотечения из верхних отделов пищеварительного тракта. Красный цвет чаще всего обусловлен примесью неизмененной крови при кровотечениях из толстой кишки. Из патологических примесей в кале можно обнаружить слизь, кровь, гной, а также гельминтов и др. Большое количество мышечных и соединительнотканных волокон (креаторея) - свидетельство недостаточности функции поджелудочной железы или снижения секреторной функции желудка. Обнаружение переваренной клетчатки и крахмала (амилорея) характерно для заболеваний тонкой кишки. Обнаружение в кале нейтрального жира (стеаторея) - свидетельство недостаточной липолитической функции поджелудочной железы, нейтральный жир и жирные кислоты характерны для нарушенного желчеотделения. Большое количество лейкоцитов свидетельствует о воспалительном процессе в кишечнике (дизентерия – инфекционное заболевание желудочно-кишечного тракта и др).
Тест используется, главным образом, для диагностики лактазной недостаточности (нарушению всасывания лактозы и плохой переносимости продуктов питания, содержащих молочный сахар) у детей первого года жизни Лактазная недостаточность бывает первичной и вторичной. Первичная или истинная лактазная недостаточность – это врожденный дефицит фермента. Истинная лактазная недостаточность встречается редко. Вторичная лактазная недостаточность особенно распространена среди детей первого года жизни и часто является следствием дисбактериоза кишечника либо незрелости поджелудочной железы. Вторичная лактазная недостаточность проходит после коррекции дисбактериоза или с возрастом (транзиторная), и в старшем возрасте молочный сахар нормально усваивается. Подтвердить или опровергнуть лактазную недостаточность можно, сдав анализ кала ребенка на содержание углеводов.
Подготовка к исследованию:
Кал должен быть собран в отдельную чистую посуду. Количество материала не должно быть меньше чайной ложки кала. Кал должен быть доставлен в лабораторию в течение 4-х часов от момента сбора. Если сроки доставки превышают 4 часа, то кал должен быть заморожен при -20 градусах С. Повторное размораживание/ замораживание не допускается. Нормальные значения углеводов в кале:
- Дети до 1 года – 0 – 0,25%
- Дети старше 1 года и взрослые 0%
При повышении уровня углеводов можно заподозрить лактазную недостаточность.
Простейшие - (Protozoa) - группа микроскопических одноклеточных животных.
Ферменты желудочно-кишечного тракта – биологически активные вещества, благодаря которым в большей степени происходит переваривание пищи.
Исследование кала на простейшие - это универсальный метод диагностики кишечных протозоонозов при эпидемиологических и диагностических осмотрах населения. Используется для выявления наличия цист и ооцист простейших кишечника.
Простейшие кишечника принадлежат к типу Protozoa. Характерной особенностью этого типа является то, что на всех этапах жизненного цикла они существуют в виде одной клетки. В жизненном цикле проходят две стадии: вегетативную – стадию трофозоида (активную, подвижную, размножающуюся, питающуюся) и стабильную стадию – цисты.
Обнаружение и дифференцирование простейших - один из наиболее сложных разделов исследования испражнений. Отличие патогенных форм простейших от непатогенных требует известного опыта и тщательности в работе.
Здесь следует учитывать, что большинство этих одноклеточных организмов встречается в двух формах: вегетативной - активной, подвижной, жизнедеятельной, легко поддающейся вредным воздействиям (в частности, охлаждению) и потому быстро погибающей после выделения из кишечника, и в виде устойчивых к внешним воздействиям цист. Существование вегетативных форм требует более или менее жидкой среды, поэтому они обнаруживаются преимущественно в жидком, полужидком, слизистом кале. При неблагоприятных условиях для их жизнедеятельности (например, уплотнение каловых масс) они превращаются в цисты. В оформленном кале простейшие, как правило, встречаются лишь в инцистированном состоянии.
Кал для отыскания в нем вегетативных форм должен исследоваться сразу после его выделения, еще в теплом состоянии. Необходимость этого вызывается двумя причинами. Во-первых, в остывшем кале вегетативные формы простейших быстро гибнут и мертвыми быстро поддаются действию протеолитических ферментов. Вследствие этого они сначала теряют характерные особенности своей структуры, позволяющие отличать патогенные формы от непатогенных, а затем и совсем растворяются. Во-вторых, при остывании уменьшается, а затем исчезает подвижность простейших - важный вспомогательный фактор при их дифференцировании.
Следует заметить, что сохранение кала в термостате не допускается, так как в условиях искусственного подогревания простейшие очень быстро подвергаются дегенеративным изменениям, затрудняющим их распознавание.
В оформленном кале, как правило, встречаются только цисты, однако в комках слизи, находящихся на его поверхности, иногда можно найти и вегетативные формы. Поэтому определение вегетативных форм простейших, находящихся в слизи, следует производить по возможности быстро.
Иногда для обнаружения простейших, особенно амеб, используют материал, полученный при ректороманоскопии. В этих случаях особенно нужно помнить о необходимости правильного обращения с полученным незначительным количеством материала. За время транспортировки в лабораторию, расположенную даже в том же здании, эта капля успевает остыть, а иногда и высохнуть. Поэтому лучше всего подготовить все необходимое для исследования в том же помещении, где проводится эндоскопия. Смазывания ректоскопа вазелиновым маслом или жиром делают последующую микроскопию затруднительной.
Для обнаружения в кале простейших прибегают к ряду методов. Трудности, сопряженные с обнаружением цист простейших, могут быть в известной степени преодолены путем применения методов концентрации. Культивирование простейших и заражение ими животных, применяемые в основном с научными целями, ввиду сложности методики малопригодны в повседневной практической работе. Выделение простейших с калом происходит непостоянно. Поэтому не следует ограничиваться при их поисках однократным исследованием. Последнее нужно повторить 4-5 раз через 2-3 дня.
Унифицированные методы определения простейших с помощью нативного мазка н мазка с раствором Люголя.
Принцип. Движущиеся простейшие обнаруживаются при исследовании суспензии каловых масс в изотоническом растворе хлорида натрия с помощью микроскопа. Препарат в этом растворе служит прежде всего для выявления вегетативных форм простейших, которые распознаются по характеру движения. Препарат суспензии каловых масс в растворе Люголя в основном используют для дифференцирования цист простейших.
Оценка результатов. Исследуют 2-3 препарата, отмечая всех замеченных простейших. В сомнительных случаях или при получении отрицательного результата анализ повторяют; на протяжении 1-2 нед проводят не менее 3 анализов. Метод позволяет наряду с непатогенными простейшими выявить Entamoeba histolitica и Balantidium coli, а также условно-патогенную Lamblia intestinalis.
Унифицированный метод с применением консервантов.
Принцип. Простейшие фиксируются в каловых массах консервирующим раствором, поэтому морфологические признаки простейших длительное время остаются без изменений.
Оценка результатов. Исследуют 2-3 препарата, отмечая всех обнаруженных простейших. Структуры простейших при применении консервантов окрашиваются в синий цвет красителем. Внутренняя структура балантидиев в консервированном материале становится незаметной, и балантидиев обнаруживают лишь по войлокообразному слою ресничек по периферии клетки.
Унифицированный метод формалин-эфирного обогащения.
Принцип. Формалин-эфирная обработка позволяет выделять и концентрировать цисты простейших.
Оценка результатов. При исследовании препарата отмечают всех обнаруженных простейших. Метод позволяет выявить цистные их формы. Основные формы простейших представлены ниже.
Класс корненожек (Shizopoda)
К классу корненожек относятся амебы. Характерной особенностью вегетативной стадии этого одноклеточного организма является отсутствие оболочки, вследствие чего тело не имеет постоянной формы. При неблагоприятных условиях тело амебы покрывается оболочкой и она превращается в цисту - устойчивую форму, способную сохранять жизнеспособность вне организма человека. В цисте ядро делится на 2-4-8 частей. Попав в кишечник человека, циста под влиянием пищеварительных ферментов освобождается от своей оболочки. Протоплазма ее делится с образованием одноядерных вегетативных особей, количество которых соответствует числу ядер цисты.
Главная задача, возникающая при обнаружении амеб,- различить патогенную дизентерийную от непатогенных форм. Поэтому лабораторный работник должен быть знаком с морфологическими особенностями этих видов простейших.
Entamoeba histolytica.
В свежем нативном препарате дизентерийная амеба имеет вид почти бесцветного неопределенной формы комочка. Ядра в ней не видно. Протоплазма ясно делится на зоны: наружную - гомогенную эктоплазму и внутреннюю - эндоплазму. Первая примерно в 2 раза меньше второй.
При движении амебы псевдоподии возникают из эктоплазмы, а затем в образовавшееся выпячивание постепенно вливается эндоплазма. Характер движения является одной из типичнейших особенностей дизентерийной амебы. Псевдоподия выбрасывается ею мгновенно, а при перемещении в нее эндоплазмы движение становится поступательным. Все это отличает дизентерийную амебу от кишечной, у которой нет деления на эндо- и эктоплазму; форма меняется очень медленно, и при образовании псевдоподий тело не перемещается в пространстве.
Е. histolytica встречается в кишечнике в двух формах: тканевой и просветной. Тканевая форма, называемая также Е.histolytica forma magna, получила свое название вследствие того, что она проникает в ткани хозяина и, поселяясь там, вызывает изъязвление стенки кишечника. Ее встречают в кале при остром амебиазе. Размер этой амебы колеблется в значительных пределах (от 16 до 60 мкм). В состоянии покоя, когда форма тела приближается к округлой, размер ее 20-30 мкм, а в вытянутом состоянии длина может быть в 2 раза больше. Наличие в протоплазме амеб эритроцитов является очень важным диагностическим признаком, так как непатогеиные формы никогда их не содержат. Бактерии в протоплазме живой тканевой формы встречаются как исключение. Обычно они проникают в тело амебы только после ее гибели. Просветная форма, или Е.histolytica forma minuta, обитает в просвете кишечника (отсюда и ее название). В стенку кишечника она не внедряется, поэтому не вызывает ее изъязвления и соответствующей клинической картины. Просветная форма амебы обнаруживается у лиц, выздоравливающих от острого амебиаза, у страдающих хронической формой заболевания и у носителей.
Отличия просветной формы от тканевой следующие: она меньше размером - обычно 12-25 мкм, изредка еще меньше. Движение совершается более медленно, хотя иногда наблюдается выбрасывание псевдоподий. В протоплазме эритроцитов нет и содержится небольшое количество бактерий.
Цисты Е. histolytica правильной круглой формы, бесцветны, диаметр их в среднем 10- 12 мкм. Протоплазма слегка зерниста, ядра (1-4) без окраски плохо различимы. В некоторых цистах можно заметить хроматоидные тела - короткие, бесцветные, сильно преломляющие свет палочки с закругленными концами, которым приписывается роль запасного питательного материала. Эритроцитов цисты никогда не содержат.
В препарате, окрашенном раствором Люголя, можно обнаружить у цисты ясно различимую двухконтурную оболочку, ядра и гликогеновую вакуоль. Ядра выглядят как колечки, в центре которых в виде блестящей точки расположена кариосома. Зрелая циста содержит 4 ядра. Хроматоидные тела не окрашиваются йодом.
Наиболее характерным признаком дизентерийной амебы является строение ее ядра. Оно имеет округлую форму с диаметром 3-8 мкм и располагается в эндоплазме эксцентрично. В центре ядра находится округлая или многоугольная, правильной формы, около 0,5 мкм в поперечнике, кариосома, окруженная светлой зоной. Пространство между кариосомой и оболочкой не содержит никаких зерен. Дизентерийную амебу необходимо отличать от обнаруживаемых в кишечнике непатогенных форм.
Entamoeba hartmanni - непатогенная амеба, имеющая наибольшее сходство с E.hisiolytica в строении тела, но отличающаяся значительно меньшей величиной. Вегетативные формы ее имеют размер от 5 до 12 мкм. Размер 4-ядерных цист - от 5 до 10 мкм. Движения ее совершаются медленно, эритроцитов она не фагоцитирует.
Entamoeba coli - наиболее часто встречающийся в кишечнике вид амеб. В нативном препарате вегетативная форма имеет размер 29-30 мкм в округлившемся состоянии и до 60 мкм в вытянувшемся. В протоплазме нет деления на эндо- и эктоплазму, она не содержит эритроцитов. В больших щелевидных вакуолях имеется значительное количество разнообразных включений: бактерии, грибы, лейкоциты, крахмальные зерна, цисты других простейших. Движения медленные, не имеют поступательного характера. В отличие от Е.histolytica ядро заметно и в нативном и еще лучше в окрашенном йодом препарате. Цисты E.coli круглой формы, крупнее цист дизентерийной амебы: их диаметр в среднем около 19-20 мкм. Двухконтурная оболочка толще, чем у Е. histolytica. Ядер от 1 до 8, они могут быть заметны и в неокрашенных препаратах, но лучше видны после окраски йодом.
Стадия 4-ядерной цисты очень кратковре- менна и поэтому наблюдается редко в отличие от Е. histolytica; нахождение 8-ядерных цист подтверждает их принадлежность к виду Е. coli. В связи с тем что ядра лежат в разных плоскостях сферического тела цисты, то увидеть и правильно подсчитать их можно только, работая микрометрическим винтом. При окраске йодом можно заметить в ядре кариосому, а в протоплазме незрелых (I-2-ядерных) цист - большую гликогеновую вакуоль.
Endolimax nana - непатогенная амеба малого размера (в среднем около 7 мкм). В препарате свежевыделенного кала при температуре человеческого тела (на нагревательном столике) движения ее довольно активны, напоминают движения Е. histolytica, но при остывании препарата они быстро прекращаются. Протоплазма, делящаяся на эндо- и эктоплазму, никогда не содержит эритроцитов, в ее вакуолях заметно лишь большое количество включенных микробов. Ядро в нативном препарате незаметно.
Цисты круглой или чаще овальной формы размером 8-16X6-8 мкм содержат 1-4 ядра. Как в не окрашенном, так и в окрашенном йодом препарате их трудно отличить от мелких цист дизентерийной амебы.
Jodamoeba butschlii - непатогенная амеба размером от 8 до 20 мкм. Движения медленные, быстро прекращающиеся при остывании препарата,- Псевдоподии образуются из эктоплазмы; эндоплазма зернистая, ее вакуоли содержат бактерии, крахмал и другие частицы, но никогда в них нет эритроцитов. В неокрашенных препаратах ядро обычно незаметно, при окраске гематоксилином оно довольно большого размера с тонкой оболочкой и большой кариосомой. Последняя лежит в центре ядра, занимая примерно половину его, и окружена светлой зоной.
Более характерными особенностями отличаются цисты этой амебы. Они имеют различную, часто неправильную форму, довольно толстую двухконтурную оболочку и, как правило, одно ядро. Наиболее характерен их вид при окраске раствором Люголя. На фоне зеленовато-желтой протоплазмы резко выступает ясно контурированная большая гликогеновая вакуоль, интенсивно окрашенная в красновато-коричневый цвет. Она занимает около половины протоплазмы. Изредка гликогеновых вакуолей бывает 2 или 3.
Класс жгутиковых (Flagellata).
Lamblia intestinalis.
Лямблии, как и описываемые ниже трихомонады, относятся к классу жгутиковых. Общей особенностью последних является наличие на поверхности тела одного или нескольких жгутиков, с помощью которых они передвигаются. В отличие от амеб тело жгутиковых покрыто оболочкой, наличие которой обусловливает постоянство их формы.
На окрашенных препаратах выявляется довольно сложное внутреннее строение лямблий. Они полностью билатерально симметричны. Посередине тела по его длине проходят два параллельных нитевидных опорных образования - аксостили. По обе стороны от них симметрично расположены 2 ядра и 4 пары блефаробластов - точечных телец, от которых отходит такое же число жгутиков. Имеется только одно непарное образование - парабазальное тело, отходящее в форме запятой от середины аксо- стиля; назначение его неизвестно.
При исследовании кала наиболее важно уметь обнаружить и отличить цисты лямблий, обнаружение которых позволяет нередко поставить диагноз лямблиоза без дуоденального зондирования. В нативном препарате цисты лямблий выглядят овальными, реже круглыми, бесцветными, светопреломляющими образованиями длиной 10-14 мкм с двухконтурной прозрачной оболочкой.
Более ясная картина получается при окраске раствором Люголя. В таком препарате ясно видны оболочка цисты, аксостиль, 2 или 4 ядра, лежащие у одного из полюсов, блефаробласты, жгутики. Все это образует сложный, но характерный рисунок.
Trichomonas hominis.
Chilomastix mesnili - непатогенный жгутиконосец, грушевидной формой тела напоминающий трихомонады. Отличается от последних отсутствием ундулирующей перепонки, наличием спиральной борозды, проходящей через все тело от переднего конца к заднему. Жгутиков четыре, расположены они у переднего конца, три из них направлены кпереди и обусловливают быстрое вращательное движение простейшего, и один жгутик лежит вдоль ротового отверстия. Последнее находится в переднем конце и по длине равно 1/3-1/2 тела. Длина Chilomastix mesnili 13-24 мкм, ширина 6-10 мкм. На окрашенном препарате видно круглое ядро, расположенное в передней части тела, с несколькими зернами хроматина и одной кариосомой. В протоплазме много пищевых вакуолей, наполненных бактериями. Аксостиля нет. Цисты формой напоминают лимон размером 7-9 X 5-6 мкм. В окрашенных йодом цистах видны одно ядро, извивающийся жгутиковый аппарат и фибриллы, окаймляющие цнтостом.
Класс ресничных (Ciliata).
Balantidium coli.
В. coli образует цисты сферической формы диаметром 50-60 мкм. Они покрыты бесцветной двухконтурной оболочкой. В окрашенных препаратах у них виден макронуклеус и одна сократительная вакуоль (нефункционирующая).
Класс споровиков (Sporozoa).
Blastocystis hominis. В кале нередко встречается образование, похожее на цисты простейших и могущее быть принято за них. Это бластомицет (гриб) Blastocystis hominis. Он обнаруживается чаще в жидком, чем нормальном, кале, но является, по-видимому, безвредным обитателем кишечника, Бластоцисты легко отличить от цист простейших при окраске йодом. Они имеют почти правильную круглую форму, различную величину - от 5 до 30 мкм в диаметре. Вся центральная часть их тела занята большой вакуолью - гомогенной, круглой, не окрашивающейся йодом. Протоплазма оттеснена к периферии и окружает вакуоль тонким слоем в виде кольца.
Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник / Меньшиков В.В. М.: Медицина, - 1987 год - 368 с.